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一、系統(tǒng)簡介

　　實時熒光定量PCR系統(tǒng)主要用于運行實時熒光定量PCR實驗，通過熒光激發(fā)和采集的方式，對實驗過程進行實時監(jiān)控，將實驗過程數(shù)據(jù)繪制成熒光曲線，實時呈現(xiàn)于儀器顯示界面，并對實驗數(shù)據(jù)進行擬合和分析，最后可生成PDF格式的實驗報告。

　　對取于其他動物體內(nèi)的生物樣本（如血液，體液等）中包含的目標(biāo)核酸，進行快速精準(zhǔn)的定性和定量分析，同時也能夠?qū)μ厥鈽颖具M行標(biāo)準(zhǔn)曲線，熔解曲線，基因分型等分析。

二、基本原理

　　實時熒光定量PCR儀器的原理：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA擴增，由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個溫度循環(huán)周期，使目的基因得以迅速擴增，具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點，是基因擴增技術(shù)的一次重大革新。PCR技術(shù)可將極微量的目標(biāo)DNA特異地擴增上百萬倍，從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力。

　　實時熒光定量PCR技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入相應(yīng)的熒光染料或熒光標(biāo)記探針，在PCR反應(yīng)過程中通過熒光信號變化，對整個PCR進程進行實時檢測，以熒光化學(xué)物質(zhì)監(jiān)測每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法，通過內(nèi)參或外參的方法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。

三、應(yīng)用領(lǐng)域

　　◆食源性致病菌檢測

　　◆動植物源性檢測

　　◆植物科學(xué)與農(nóng)業(yè)生物技術(shù)

　　◆基因突變及多態(tài)性

　　◆基礎(chǔ)科學(xué)研究

　　◆水體監(jiān)測

　　◆病原核酸檢測

　　◆ 轉(zhuǎn)基因檢測

　　◆動物疫情監(jiān)測

　　◆食品衛(wèi)生檢疫

　　◆海關(guān)進出口檢疫

四、儀器基本結(jié)構(gòu)

　　實時熒光定量PCR系統(tǒng)是實時檢測反應(yīng)的儀器，主要由基因擴增熱循環(huán)系統(tǒng)、熒光實時檢測系統(tǒng)、微電路控制系統(tǒng)、計算機及應(yīng)用軟件組成。其中兩個核心功能模塊：熱循環(huán)系統(tǒng)和熒光實時檢測系統(tǒng)。其中基因擴增熱循環(huán)系統(tǒng)工作原理與傳統(tǒng)基因擴增儀工作原理基本相同，采用半導(dǎo)體加熱制冷工作方式完成熱循環(huán)過程。熒光檢測系統(tǒng)主要有由熒光激發(fā)部件、光信號傳輸部件、熒光檢測部件、控制系統(tǒng)組成。

五、儀器特點

　　1、體積小，重量輕，方便攜帶，兼容0.2PCR單管、八聯(lián)管;

　　2、采用美國MARLOW定制型帕爾貼模塊高級別半導(dǎo)體芯片，新一代半導(dǎo)體升降溫技術(shù)，最快變溫速率可達每秒7度，使用壽命可達一百萬次循環(huán);

　　3、采用采光檢測處理技術(shù)，自動調(diào)節(jié)熒光本底，提高熒光信號靈敏度和信噪比，獲得更佳結(jié)果;

　　4、13S四通道快速采光，熒光采集信號穩(wěn)定，減少延時誤差;

　　5、采用免維護的長壽命LED光源，無需更換，獨立熒光通道，不同通道之間的串?dāng)_更小;

　　6、恒流式控制電路，功率輸出平滑，延長 Peltier壽命，提高控溫精度;

　　7、具有過流、過溫、瞬時斷電數(shù)據(jù)自恢復(fù)等保護功能，儀器重啟后繼續(xù)運行未完成實驗，確保實驗安全運行;

　　8、強大的軟件分析功能，可以進行定量分析，熔解曲線分析，基因分型等，分析軟件升級，支持不同行業(yè)的軟件定制;

　　9、支持恒溫、熒光定量雙模式，適配市面上多數(shù)的恒溫PCR試劑盒和熒光定量PCR試劑盒;

　　10、自帶10寸彩色觸摸屏控制，也可以連接電腦控制。

六、儀器技術(shù)指標(biāo)

“///” 符號表示國家標(biāo)準(zhǔn)目前沒有定義該項指標(biāo)或者強制性要求。

指標(biāo)名稱	H160	H320		H480
外觀
外形尺寸	235mm385mm175mm（寬深高）
重量	5.6kg	5.7kg		5.8Kg
電氣參數(shù)	~220V/50Hz，255W
數(shù)據(jù)接口	USB 2.0 *2（右側(cè)兩個）
環(huán)境參數(shù)
運行條件	溫度：10-30℃，濕度：20%~80%
運輸及貯存條件	溫度：-20~55℃，濕度：20%~80%
海拔高度	<2500米
噪聲等級	A計權(quán)，<60dB
樣本參數(shù)
樣本容量	16*0.2mL		32*0.2mL	48*0.2mL
試管類型	單管，八聯(lián)排試管
樣本容積	15-100uL
溫度特性
加熱/冷卻方式	半導(dǎo)體加熱/制冷
溫度范圍	4℃-99℃
最大升溫速率	≥5.5℃/s
平均升溫速率	≥3.5℃/s
最大降溫速率	≥4.5℃/s
平均降溫速率	≥2.5℃/s
控溫精度	≤±0.01℃
溫度準(zhǔn)確度	≤±0.1℃
溫度均勻性	≤±0.3℃
光學(xué)特性
熒光檢測通道數(shù)	4通道
發(fā)光器件	高亮度LED
采光器件	高靈敏度，高信噪比光電二極管
適配探針或染料	第一通道：470/520 FAM,SYBR Green
	第二通道：530/570 HEX,JOE,VIC
	第三通道：580/610 ROX,CY3.5,Texas-Red
	第四通道：630/670 CY5
檢測靈敏度	1個拷貝
線性檢測范圍	100~1010個拷貝
線性相關(guān)系數(shù)	≥0.999
通道交叉串?dāng)_	無串?dāng)_
檢測重復(fù)性	≤1.0%

參考資料

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