齊一生物人5脂加氧酶（5-LO） 檢測(cè)試劑盒

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齊一生物人5脂加氧酶(5-LO) 檢測(cè)試劑盒操作步驟：
1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為9mmol/L，6 mmol/L，3 mmol/L，1.5mmol/L， 0.75 mmol/L）。
2、加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7、溫育：操作同3。
8、洗滌：操作同5。
9、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
10、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11、測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。BxPC-3(原位胰腺腺癌細(xì)胞) 
KP-N-NS(腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)) 
AsPC-1(轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞) 
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U-2 OS(骨肉瘤細(xì)胞) 
U-2 OS(骨肉瘤細(xì)胞) 
GBC-SD(膽囊癌細(xì)胞) 
RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞) 
RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞) 
HCCC-9810(膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞) 
A-673(橫紋肌瘤細(xì)胞) 
SMMC-7721(肝癌細(xì)胞) 
SMC-1(胸膜細(xì)胞瘤) 
QGY-7703(肝癌細(xì)胞) 
NCI-H446 [H446](小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 
QGY-7701(肝癌細(xì)胞) 
BEL-7405(肝癌細(xì)胞) 
NCI-H460 [H460](大細(xì)胞肺癌細(xì)胞0 
NCI-H460 [H460](大細(xì)胞肺癌細(xì)胞0 
BEL-7404(肝癌細(xì)胞) 
BEL-7402(肝癌細(xì)胞) 
QG-56(肺扁平上皮癌細(xì)胞) 
SPC-A-1(肺腺癌細(xì)胞) 
HGC-27(胃癌細(xì)胞（未分化）) 
LTEP-a-2(肺腺癌細(xì)胞) 
AGS(胃腺癌細(xì)胞) 
MGC80-3(胃癌細(xì)胞) 
95-D(高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞) 
BGC-823(胃腺癌細(xì)胞（低分化）) 
BT549(乳腺管癌細(xì)胞) 
SGC-7901(胃腺癌細(xì)胞) 
T-47D(乳腺管癌細(xì)胞) 
T-47D(乳腺管癌細(xì)胞) 
TE-11(食管癌細(xì)胞) 
SK-BR-3(乳腺腺癌細(xì)胞) 
SK-BR-3(乳腺腺癌細(xì)胞) 
TE-10(食管癌細(xì)胞) 
ZR-75-30(乳腺癌細(xì)胞) 
TE-1(食管癌細(xì)胞) 
Bcap-37(乳腺癌細(xì)胞) 
Eca-109(食管癌細(xì)胞) 
MDA-MB-453(乳腺癌細(xì)胞)