現(xiàn)貨供應(yīng)人抑癌基因SEMA3B檢測試劑盒

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現(xiàn)貨供應(yīng)人抑癌基因SEMA3B檢測試劑盒ELISA試劑盒操作步驟
ELISA試劑盒使用前,將所有試劑充分混勻.不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差.
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù).每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔.每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔.標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi).
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi).立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體.蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時.
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘.
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘.避免光照.
取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果.
在450nm波長處測定各孔的OD值.
ELISA操作步驟
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)材料,試劑,溶液
1．酶標(biāo)板,100μltip頭,1mlEp管,濕盒
2．包被稀釋液（0.05mol/L碳酸鈉-碳酸氫鈉buffer,pH9.6）
碳酸鈉0.15g,碳酸氫鈉0.29g,疊氮鈉0.02g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH9.6
3.封閉液(5%小牛血清/PBS溶液)
小牛血清5ml,1*PBS(pH7.4)95ml
4.洗滌液(PBST,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,Tween200.05ml,疊氮鈉0.01g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH7.4
5.樣本稀釋液(PBS,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,疊氮鈉0.01g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH7.4
6.酶標(biāo)第2抗體(羊抗兔)稀釋范圍1:5,000-1:100,000
7.底物液(TMB-過氧化氫尿素溶液)
①底物液A:TMB20mg,無水乙醇10ml,加雙蒸水100ml.
②底物液B(0.1mol/L檸檬酸-0.2mol/L磷酸二氫鈉緩沖液,pH5.0-5.4)
Na2HPO41.46g,檸檬酸0.933g,0.75%過氧化氫尿素0.64ml,加三蒸水100ml,調(diào)pH5.0-5.4
③底物A和B按1:1混合即成TMB-過氧化氫尿素溶液.
8.終止液(2mol/LH2SO4溶液)雙蒸水200ml,濃硫酸34ml,(緩慢滴加并不斷攪拌),加雙蒸水300ml
9.0.9%生理鹽水Hyclone  SH30079.03 FBS透析性胎牛血清 500ML
Hyclone  SH30079.02 FBS透析性胎牛血清 100ML
Hyclone  SH30066.03 FetalClone? II
Hyclone  SV30087.01(南美普通)胎牛血清 100ML
Hyclone  SV30087.02(南美普通)胎牛血清 500ML
Hyclone  SH30370.03(標(biāo)準(zhǔn)型澳大利亞)胎牛血清 500ML
Hyclone  SH30406.02 (新西蘭)胎牛血清  500ML
Hyclone  SH3080.03(北美來源FC)胎牛血清  500ML
Hyclone  SH30401.01 新生牛血清 500ML
Hyclone  SH30088.03 標(biāo)準(zhǔn)型胎牛血清500ML
Hyclone  SH30070.03 北美特級胎牛血清 500ML
Hyclone  SH30070.02北美特級胎牛血清100ML
Hyclone  SH30070.03E 干細(xì)胞胎牛血清 500ML
Hyclone  SH30070.02E 干細(xì)胞胎牛血清 100ML
Hyclone  SH30068.03 活性炭處理胎牛血清500ML
Hyclone  SH30068.02 活性炭處理胎牛血清100ML
Hyclone  SH30084.03(澳洲血源)胎牛血清 500ML
Hyclone  SH30396.03 (加拿大血源)胎牛血清 500ML
Hyclone  SH30071.03 (優(yōu)等型美國來源)胎牛血清 500ML
Hyclone  SH30074.03 馬血清 500ML
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Gibco 26400044（FBS, DIALYZED, USA ORIGIN 500ML）
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