抗核糖核蛋白抗體（RNP-Ab）ELISA檢測試劑盒

抗核糖核蛋白抗體（RNP-Ab）ELISA檢測試劑盒檢測的原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。 報價，檢測原理，使用說明書。廠家現(xiàn)貨直銷，齊一生物科技專業(yè)生產(chǎn)研發(fā)經(jīng)營穩(wěn)定、優(yōu)質(zhì)、高效、實用的ELISA試劑盒，公司提供ELISA試劑盒免費代測，ELISA試劑盒批發(fā)價零售，ELISA試劑盒專業(yè)生產(chǎn)廠家，ELISA試劑盒進(jìn)口品牌！全國：

抗核糖核蛋白抗體（RNP-Ab）ELISA檢測試劑盒產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
產(chǎn)品庫存：現(xiàn)貨
產(chǎn)品價格：詢價
使用范圍：僅供科研檢測,不得用于臨床.
保存條件：2-8℃
發(fā)貨方式：專門快遞免費送貨上門
產(chǎn)品價格：*,洽談！
說明書:說明書隨貨發(fā)送,您也可以直接我司在線銷售人員索取.全國：代理多種品牌進(jìn)口原裝、分裝“ELISA試劑盒”.齊一生物科技有限公司作為酶聯(lián)免疫供應(yīng)商,憑借*的技術(shù),*的售前,售中,售后免費代測服務(wù),共同鑄就高品質(zhì)的產(chǎn)品.多年專業(yè)酶免服務(wù),質(zhì)量保證,可免費提供代測服務(wù),一周內(nèi)出結(jié)果.咨詢訂購.
ELISA試劑盒操作步驟
ELISA試劑盒使用前,將所有試劑充分混勻.不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差.
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù).每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔.每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔.標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi).
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi).立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體.蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時.
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘.
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘.避免光照.
取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果.
在450nm波長處測定各孔的OD值.
ELISA操作步驟
酶聯(lián)免疫吸附實驗材料,試劑,溶液
1．酶標(biāo)板,100μltip頭,1mlEp管,濕盒
2．包被稀釋液（0.05mol/L碳酸鈉-碳酸氫鈉buffer,pH9.6）
碳酸鈉0.15g,碳酸氫鈉0.29g,疊氮鈉0.02g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH9.6
3.封閉液(5%小牛血清/PBS溶液)
小牛血清5ml,1*PBS(pH7.4)95ml
4.洗滌液(PBST,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,Tween200.05ml,疊氮鈉0.01g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH7.4
5.樣本稀釋液(PBS,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,疊氮鈉0.01g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH7.4
6.酶標(biāo)第2抗體(羊抗兔)稀釋范圍1:5,000-1:100,000
7.底物液(TMB-過氧化氫尿素溶液)
①底物液A:TMB20mg,無水乙醇10ml,加雙蒸水100ml.
②底物液B(0.1mol/L檸檬酸-0.2mol/L磷酸二氫鈉緩沖液,pH5.0-5.4)
Na2HPO41.46g,檸檬酸0.933g,0.75%過氧化氫尿素0.64ml,加三蒸水100ml,調(diào)pH5.0-5.4
③底物A和B按1:1混合即成TMB-過氧化氫尿素溶液.
8.終止液(2mol/LH2SO4溶液)雙蒸水200ml,濃硫酸34ml,(緩慢滴加并不斷攪拌),加雙蒸水300ml
9.0.9%生理鹽水

操作步驟:
1.包被過程(注意設(shè)置空白對照,陰性對照):
將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當(dāng)濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋或?qū)迤椒旁诘撞坑袧窦啿嫉慕饘贊窈兄?
2.封閉酶標(biāo)反應(yīng)孔:
5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時將封閉液加滿各反應(yīng)孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結(jié)束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
洗滌方法:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動,吸干孔內(nèi)液,傾去液體后在吸水紙上拍干
洗滌次數(shù)3次
3.加入待檢測樣品(建立合適的濃度梯度):
檢測時一般采用1:50-1:400的稀釋度,應(yīng)采用較大稀釋體積進(jìn)行,一般保證樣品吸取量>20μl.
將稀釋好的樣品加入酶標(biāo)反應(yīng)孔中,每樣品少加雙孔,每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
4.加入酶標(biāo)抗體:
酶標(biāo)抗體:根據(jù)酶結(jié)合物提供商提供的參考工作稀釋度進(jìn)行.37℃,30-60min之間.短于30min往往結(jié)果不穩(wěn)定.每孔加100μl.洗滌同前.
5.加入底物液(現(xiàn)用現(xiàn)配):
*TMB-過氧化氫尿素溶液,OPD-過氧化氫底物液系統(tǒng)次之.
底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分鐘,加入終止液顯色.
6.終止反應(yīng):
每孔加入終止液50μl終止反應(yīng),于20min內(nèi)測定實驗結(jié)果.
7.結(jié)果判斷:
OPD顯色后采用492nm波長,TMB反應(yīng)產(chǎn)物檢測需要450nm波長.檢測時一定要首先進(jìn)行空白孔系統(tǒng)調(diào)零.用測定標(biāo)本孔的吸收值與一組陰性標(biāo)本測定孔平均值的比值(P/N)表示,當(dāng)P/N大于2時作為抗體的效價.(數(shù)值的大小依具體檢測要求而定.)

9019890    Foam insert, rotor securing, QIAC
336391    SureSilencing shRNA Control
330522    RT2 SYBR Green ROX qPCR Mastermix (12)
330411    RT2 HT First Strand Kit (96)
336161    Multi-Analyte  ELISArray Kit
9020716    Optoswitch, X axis, C34
9020712    Rail, x axis, C34
9242544    Power Input Module, Eppendorf, AP196/98
9020713    Rail guide, x axis, C34
9020911    Foot assembly, SMC, QGX
9020679    Rail, left, CX1
9022916    Gas press.spring conversion kit QG/QXT
9012771    Liquid Handling Kit Plato 7382/7182
9013150    BGR Tischabstützung  Digene
9013205    BGR Labhand li+re Digene
9014878    Card, x-main, shaker
202605    HotStar HiFidelity Polymerase Kit (1000)    2 x 500 units HotStar HiFidelity DNA Polymerase, 5x PCR Buffer containing dNTPs, 5x Q-Solution, 25 mM MgSO4, RNase free water
9019368    Damper, lid, RG6
9019386    Photo Multiplier Tube with cable, RG3
9019393    Solenoid, cooling with flap, RG3
9019417    Fan, lid, RG3
9019424    Wiring, lower heater, RG3
9019446    Memory card 32MB SDl w/S/W
9019451    Switch incl. 2K2 resistor, P/R, HS
9019473    Loading guide, 52 well sharkstooth, GSC
9019505    PLATE SEPARATOR 48 WELL HIGH
9019510    CHAMBER MAIN VAC STATION 1820
9019543    Bow spring, table rail, Cxx
9019565    Clamp, cable 2 wires 2 tabs, Cxx
9242545    Quick Disconnect O-ring set, LC
9242337    Tool, calibration, AS, Qsym
9018092    Cooling adapter, RG strip tubes 72, Qsym
9020390    Kit, fuse AS, Qsym
4870004    PG Influenza A RT-PCR Kit (48) Z
9022321    RS-232 Cable (2), careHPV
273505    pigtype Trichinella Ab (20)
273401    pigtype Toxoplasma Ab (1)
270043    cattletype BHV1 gB Ab (5)
288103    bactotype Mycoplasma Mg/Ms PCR Kit (24)
9021234    Vacuum Pump (100 V), PyroQ24VW
9011151    Valve, dilutor, 4-port
204443    QuantiTect Probe RT-PCR Kit (200)    For 200 x 50 ul reactions: 3 x 1.7 ml QuantiTect Probe RT-PCR Master Mix,* 100 ul QuantiTect RT Mix, 2 x 2.0 ml RNase-free water
9011243    Holder, bar-code camera, STS, BR3000
9011501    Coupling, Z motor, buffer track, BR8000
9012390    Wash station, 4-probes v2.01
9012671    Cable, PCON98 to release valve, BR8000
4500265    artus HSV-1/2 RG PCR Kit (96) CE
130703    NeXtal Tubes Cryos Suite
132101    NeXtal DWBlock Adhesive Foils
9019509    Pinch Valve, C18
9019542    Gas Strut, lid, 145 N, CQx
9019563    Bracket, mounting Y-axis, Cxx
9020392    PCB, connect drawer, chassis AS, Qsym
9020633    Pos. aid (1), waste box, Cabinet Qsym
9020252    UPG Waste bag holder, Qsym
9242546    Probe Holder Assembly, LX200, LC
4872004    PG AIV-H5 RT-PCR Kit (48)  Z
1072538    HotStarTaq DNA Polymerase (5x5000)
9022474    Shipment Box, careHPV
619024    careBrush, CE
271906    cattletype Milk Prep Kit (50)
280437    virotype BTV RT-PCR Kit (480)
289980    intype IC-DNA (1ml)
1018013    Buffer RPE (55/250) N,KG
9230446    Probe, stainless steel, 0.9mm, 158 mm
310107    BioMag Goat Anti-Rat IgG (500ml)    BioMag goat anti-rat IgG secondary antibody suspension (1 mg/ml)
9010892    Gripper, left, handler, BR8000
9011730    Cable, level sensor, BR8000
9012392    Bottle, waste, 10 l, BR8000
9012714    Tubing set, auto vac, BR8000
9012803    Chuck, collet, probe, BR8000 v1.00
9013181    Tubing, pump outlet, DISU, BR8000
130715    NeXtal Tubes ProComplex Suite
130717    NeXtal Tubes ComPAS Suite
218300    miScript Primer Assay (100)
9019005    Door lock assembly, EZ1xl
9019019    Coil, EZ1xl
9019020    Coupling, Z axis, EZ1xl
9019914    PCB, HEPA filter, CAS
9019758    Interlock jumper (2), V2, QX
950120    Digest Enzyme (DX) (5.5 ml)
950220    Digest Enzyme (VX) (5.5 ml)
9018997    Cover, front, left, EZ1xl
9019006    Power supply, EZ1xl
9019636    Board, power branching, EZ1xl
9019757    Anti-rotation tool, V2, QX
9019766    Sensor, Y, with cable, V2, QX
950263    Final Wash Reagent (VXF) (350 ml)
763134    PAXgene Blood miRNA Kit (50)
9019804    ZLV Upgrade Package 2, RCS
9242800    Fan,230V,AP
9022021    Purge line (incl. tubes & fittings), QXA
9023302    PCB - Mainboard, RGQII, BioControl
4570306    artus MRSA/SA QS-RGQ Kit(72)
51106    QIAamp DNA Blood Mini Kit (250)    For 250 DNA minipreps: 250 QIAamp Mini Spin Columns, QIAGEN Protease, Reagents, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
69506    DNeasy Blood & Tissue Kit (250)    250 DNeasy Spin Columns, QIAGEN Proteinase K, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
74181    RNeasy 96 Kit (4)    For 4 x 96 total RNA preps: 4 RNeasy 96 Plates, Elution Microtubes CL (1.2 ml), Caps, RNase-free Reagents and Buffers
301305    SuperFect Transfection Reagent (1.2 ml)    For 40 transfections in 60 mm dishes or 160 transfections in 12-well plates