大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）檢測試劑盒

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大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）檢測試劑盒操作步驟：
1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為9mmol/L，6 mmol/L，3 mmol/L，1.5mmol/L， 0.75 mmol/L）。
2、加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7、溫育：操作同3。
8、洗滌：操作同5。
9、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
10、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11、測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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6X Orange DNA Loading Dye     5 x 1 mL
2X RNA Loading Dye    1 mL
TopVision Low Melting Point Agarose    25 gram
5-Fluoroorotic Acid    1 gram
5-Fluoroorotic Acid    5 gram
BCIP-T    1 gram
BCIP-T    5 gram
NBT    1 gram
NBT    5 gram
X-Gluc    0.1 gram
X-Gluc    0.5 gram
DTT    5 gram
DTT    25 gram
X-Gal Solution  ready-to-use    10 mL
25mM MgCl2    4 x 1.25 mL 
0.5M EDTA, pH8.0    5x1 ml
Aminoallyl-UTP, 50mM Solution    50 μL
Aminoallyl-dUTP, 50mM Solution    50 μL
dNTP Mix  25 mM each    1 mL
dNTP Mix  25 mM each     5 x 1 mL
6X DNA Loading Dye & SDS Solution     5 x 1 mL
6X TriTrack DNA Loading Dye     5 x 1 mL
IPTG Solution  ready-to-use    10 x 1.5 mL
3M Sodium Acetate Solution, pH 5.2, molecular biology grade    5x1 ml
dITP, 100mM Solution    0,25 mL
Resuspension Solution    70 mL
Lysis Solution     70 mL
Neutralization Solution    100 mL
Wash Solution     100 mL
RNase A      0.7mL
Elution Buffer    30 mL
Binding Buffer for GeneJET? PCR/Gel Extraction Kits     150 mL
Wash Buffer    45 mL
5X Reaction Mix for K1642    0,2 mL
5X Reaction Mix for K1642    0,8 mL
ROX Solution, 50 μM    1 mL
40x Yellow Sample Buffer    4 x 1.25 mL
ATP, Tris buffered    25 μmol
CTP, Tris buffered    25 μmol
GTP, Tris buffered    25 μmol
UTP, Tris buffered    25 μmol
NTP Set, Tris buffered    4x25 μmol
Lysis Solution (for kits K0721/2)    60 mL
Washing Buffer I (concentrated; for kits K0721/2, K0791/2)    40 mL
Washing Buffer II (concentrated; for kits K0721/2, K0781/2, K0791/2)    40 mL
Lysis Solution (for kits K0731/2, K0761)    200 mL
Wash Buffer 1 (concentrated; for kits K0731/2)    200 mL
Wash Buffer 2 (concentrated; for kits K0731/2, K0761, K0801/2 )    100 mL
Elution Buffer (for kits K0721/2, K0781/2, K0791/2)    150 mL
Resuspension Solution (for kits K0491/2)    240 mL
Neutralization Solution    240 mL
Endotoxin Binding Reagent    60 mL
Wash Solution (concentrated)    360 mL
Wash Solution (concentrated)    180 mL
Elution Buffer    60 mL
Plant RNA Lysis Solution    200 mL
Wash Buffer WB1 (concentrated)    200 mL
Lysis Buffer A    120 mL
Lysis Buffer B    15 mL
Precipitation Solution    40 mL
Plant gDNA Binding Solution    40 mL
Lysis Solution    120 mL
Wash Buffer WB1 (concentrated)    40 mL
Lysis Solution    12 mL
Wash Buffer 1 (concentrated)    25 mL