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human HSF-1 ELISA kits人熱休克因子1試劑盒試劑盒是我公司主推產(chǎn)品之一,它具有專一性強(qiáng)、靈敏度高、樣品易保存、結(jié)果易觀察等優(yōu)點(diǎn)。本品采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平,主要操作步驟如下:
稀釋→加樣→溫育→配液→洗滌→加酶→溫育→洗滌→顯色→終止→測(cè)定。操作步驟的詳細(xì)內(nèi)容請(qǐng)查閱說(shuō)明書。
此產(chǎn)品加酶標(biāo)抗體于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。加底物液顯色于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平。用純化的待測(cè)物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測(cè)物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的待測(cè)物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)濃度。
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