human PON ELISA kits 人對(duì)氧磷酶試劑盒特別說(shuō)明:
&;{96T/48T}打開(kāi)包裝后請(qǐng)及時(shí)檢查所有物品是否齊全
&:一周內(nèi)使用可存于4℃,長(zhǎng)時(shí)間存放或多次使用建議存于-20℃
human PON ELISA kits 人對(duì)氧磷酶試劑盒此試劑盒的特點(diǎn)如下:
1、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi);
2、高效、靈敏、特異;
3、適用多種標(biāo)本類型;
4、靈敏度高,可靠性強(qiáng);
操作步驟:
1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2、設(shè)置陰性對(duì)照孔、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔,陰性、陽(yáng)新對(duì)照孔各加50μL對(duì)照品;
3、樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7、每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平。用純化的待測(cè)物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測(cè)物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的待測(cè)物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)濃度。
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