表沒食子兒茶素沒食子酸酯
標本的采集及保存
1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會影響檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
標本的稀釋原則：
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。
標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。
如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
生物素標記抗體的稀釋原則：
臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：
臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。
表沒食子兒茶素沒食子酸酯
樣品測定
1． 移取xx微升 去干擾液（Reagent C）到上述待測樣品或標準樣品管里，混勻
2． 加入xx微升 反應液（Reagent D）
3． 加入xx微升 顯色液（Reagent E），混勻
4． 室溫下孵育20分鐘
5． 放進微型臺式離心機離心3分鐘，速度為5000g
6． 移取1毫升上清液到比色皿
7． 即刻放進分光光度儀檢測，獲得待測樣品和標準樣品讀數(shù)
表沒食子兒茶素沒食子酸酯
常用標簽包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。
Flag標簽系統(tǒng)利用一個短的親水性八氨基酸肽（DYKDDDDK）融合到目標蛋白；其純化條件是非變性的，因此可以純化所有有活性的融合蛋白。
His標簽是由6個組氨酸（His-His-His-His-His-His）組成的短肽，專門設計用于重組蛋白的吸附純化。由于分子量小，且較容易分離和純化，是目前使用廣泛的一種。
GST標簽體系具有蛋白表達率高，表達產物純化方便，利于GST抗體制備的特點。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到。
GFP或其突變體EGFP等廣泛用于基因表達效率的檢測，以及和目的蛋白融合表達用于檢測目的蛋白的表達和分別。GFP抗體不經可以檢測GFP或其適當?shù)耐蛔凅w，也可以檢測和GFP或其適當?shù)耐蛔凅w融合表達蛋白的表達，以及純化、定性或定量檢測GFP融合表達蛋白等。
Myc標簽（序列為：EQKLISEEDL）已成功應用于WB雜交技術、免疫沉淀IP和流式細胞術中。因此可用于檢測重組蛋白在細菌、酵母、昆蟲細胞和哺乳細胞中的表達情況。Myc重組蛋白質可通過偶聯(lián)Myc標簽抗體到活化的瓊脂糖上而進行親和純化。但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會降低蛋白質的活力，因此Myc標簽系統(tǒng)廣泛應用于檢測但很少用于純化。
HA標簽系統(tǒng)利用一個HA（influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA）短肽融合到目標蛋白。HA標簽可位于蛋白質的C端或N端，該系統(tǒng)已廣泛應用于多種細胞類型，相應的HA標簽抗體也被廣泛運用。
MBP標簽蛋白大小為40kDa，由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加在細菌中過量表達的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在細菌中表達，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗體或表達的目的蛋白特異性抗體檢測MBP標簽標記的重組蛋白。
其余標簽抗體還有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等，但應用相對較少。
~上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)。
總部位于上海，并在全國設有經銷或代理機構。產品因可靠而穩(wěn)定的質量和較為完善的售后服務確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產品為保障、以誠信為基礎、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念，擁有專業(yè)的研發(fā)和質量檢測團隊以及*的倉儲和物流系統(tǒng)。“篤瑪生物”已經得到全國科研工作者的認可，成為廣大經銷商推崇的。
公司擁有一批專業(yè)的研發(fā)人員，我們專注于生物產品的不斷完善和創(chuàng)新。產品覆蓋面廣，品質可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、生物醫(yī)學等領域的多種試劑及試劑盒。同時，提供各種常規(guī)生化試劑，庫存常備產品多達10000多種，可隨時為廣大科研工作者提供各類專業(yè)試劑。在質量方面，謹記公司信念：質量高于一切。所有研發(fā)的產品都設有嚴謹?shù)纳a流程，科學的質量檢測方法和成熟的質量檢測程序，我們恪守對每一位用戶的承諾：用專業(yè)的態(tài)度做專業(yè)的品牌。同時，公司組建了一支專業(yè)的技術服務隊伍，能夠為科研工作者提供專業(yè)的技術服務。每一位購買篤瑪生物產品的用戶都能夠得到專業(yè)的咨詢和完善的售后服務。
上海篤瑪生物科技有限公司堅持與接軌，注重和*企業(yè)的合作與交流，目前已經和Sigma、Life、Amresco、abcam、CST、santa、Corning、R＆D、Millipore、AAT、Applichem、以及Dragon等企業(yè)結成緊密的合作關系，并提供產品代理、市場咨詢等多項服務。公司將一如既往與世界更多合作，不斷為廣大生物科研工作者提供更優(yōu)質的產品和服務。
采購中心
