斑馬魚模型評價多發(fā)性硬化治療藥物篩選功效【評價原理】
多發(fā)性硬化是以中樞神經(jīng)系統(tǒng)白質(zhì)炎性脫髓鞘病變?yōu)橹饕攸c的自身免疫病,可能是遺傳易感個體與環(huán)境因素作用而發(fā)生的神經(jīng)免疫過程,由于其發(fā)病率較高,成慢性病程和傾向于年輕人罹患,而成為重要的神經(jīng)系統(tǒng)疾病之一。研究表明斑馬魚的髓鞘少突膠質(zhì)細胞的結(jié)構(gòu)特性和細胞譜系關(guān)系與哺乳動物具有高度的可比性。斑馬魚體內(nèi)與髓鞘形成相關(guān)的基因與哺乳動物具有很好的同源性。盡管這些基因與哺乳動物有些不同,但高度保守的基因序列足夠表達出功能類似的蛋白。
溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑,能誘導(dǎo)斑馬魚腦脊髓神經(jīng)細胞髓鞘損傷。經(jīng)過特異性熒光染色,髓鞘損傷的斑馬魚熒光比正常斑馬魚弱很多,可以在熒光顯微鏡下明顯被觀察到。
斑馬魚模型評價多發(fā)性硬化治療藥物篩選功效【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用髓鞘保護劑組。其中正常對照組未經(jīng)任何處理,模型對照組與服用髓鞘保護劑組都攝入了等量的溴化乙錠(溴化乙錠通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用髓鞘保護劑組先攝入溴化乙錠再攝入L-甲狀腺素鈉之類的髓鞘保護劑。
服用髓鞘保護劑后,我們對斑馬魚整體進行熒光染色,對斑馬魚髓鞘進行定量。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚多發(fā)性硬化癥表型圖
黃色箭頭為斑馬魚髓鞘細胞
可以看到,模型對照組的髓鞘細胞熒光強度較正常對照組明顯減弱,服用髓鞘保護劑組的髓鞘細胞熒光強度明顯增強。
【評價結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用髓鞘保護劑組的髓鞘細胞熒光強度明顯增強,并未出現(xiàn)模型對照組明顯髓鞘損傷的情況。
2.本實驗證實了L-甲狀腺素鈉具有明顯治療多發(fā)性硬化癥的功效。