| 一、細(xì)胞基本屬性 | |
| 細(xì)胞名稱 | 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞 |
| 細(xì)胞別稱 | NR8383; NR-8383; NR 8383; NR8383.1; AgC11x3A; Normal Rat,August 3,1983 |
| 細(xì)胞貨號 | SNL-028 |
| 細(xì)胞種屬 | 大鼠 |
| 生長情況 | 懸浮 |
| 培養(yǎng)條件 | 1640+10%FBS+1%雙抗 |
| 培養(yǎng)環(huán)境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
| 二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | |
| 換液周期 | 2-3天 |
| 培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 傳代比例 | 1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定） |
| 傳代方法 | 1. 混勻細(xì)胞，收集細(xì)胞培養(yǎng)基，900rpm離心3-5min，棄上清； 2. 加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里； 3. 補足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)； |
| 注意事項 | 部分懸浮細(xì)胞會附著瓶底，輕輕晃動培養(yǎng)基或者吹打細(xì)胞面就會脫落，不需要胰酶消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng)，更適合吹打細(xì)胞操作，吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。 |
| 三、細(xì)胞凍存操作 | |
| 凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手*)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手*); |
| 凍存規(guī)格 | 200-300萬/ml，1ml每管 |
| 凍存方法 | 1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞； 2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管； 3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存 |
| 注意事項 | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案 |
Tips：
1. 細(xì)胞懸浮生長，形態(tài)各異，偶有小聚團，部分細(xì)胞附著瓶底，細(xì)胞間隙碎片較多；
2. 圓形透亮、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞，如果無法判斷，可以取少量細(xì)胞用臺盼藍(lán)染色后計數(shù)確定細(xì)胞活率；
3. 懸浮細(xì)胞密度維持1E5-5E5/ml之間，密度過低或者過高可能會影響細(xì)胞狀態(tài)；
我們*使用尚恩生物NR8383（大鼠肺泡巨噬細(xì)胞）**培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNLM-028）作為體外培養(yǎng)NR8383（大鼠肺泡巨噬細(xì)胞）的培養(yǎng)基。
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