北分三譜農(nóng)藥殘留分析儀

1 范圍
 
本標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)定了食品中六六六( HCH) 、滴滴滴( DDD)、六氯苯、滅蟻靈、七氯、氯丹、、、異、硫丹、五氯硝基苯的測定方法。第二法規(guī)定了食品中六六六、滴滴涕( DDT) 殘留量的測定方法。
本標(biāo)準(zhǔn)法適用于肉類、蛋類、乳類動物性食品和植 物（含油脂）中a-HCH 、六氯苯、仕HCH 、
r-  HCH  、五氯硝基苯、o-HCH 、五氯苯胺、七氯、五硫酪、、氧氯丹、環(huán)氧七氯、反式氯丹、
a硫 丹、順式氯丹、p , p '-滴滴伊(DDE汃、異、仕硫丹、p , p '-DDD、o , p '-DDT 、異醒、硫丹硫酸鹽、p , p'-DDT、異酮、滅蟻靈的分析。第二法適用千各類食品中 HCH 、DDT 殘留量的測定。
法測定的檢出限隨試樣基 質(zhì)而不同，參見附錄 A。第二法的檢出限：取 樣量 2 g, 體積為

5 rnL, 進(jìn)樣體積為 10 µ.L 時，a- HCH 、/3-HCH 、Y- H C H、o-HCH 依次為 o. 038  µ.g/ kg 、o. 16 µ.g/ kg、

o. 047 µ.g/ kg、0. 070µ.g/kg;p, p'-DDE、o, p'-DDT 、p , p'-DDD、p , p'-DDT 依次為 o. 23 µ.g/ kg、o. 50 µ.g/ kg、
1. 8 µ.g/ kg 、2. 1 µ.g/ kg。
 
法 毛細(xì)管柱氣相色譜－電子捕獲檢測器法
 
2 原理
 
試樣中有機(jī)氯農(nóng)藥組分經(jīng)有機(jī)溶劑提取、凝膠色譜層析凈化，用毛細(xì)管柱氣相色譜分離，電子捕獲  檢測器檢測，以保留時間定性，外標(biāo)法定量。
3 試劑
 
3. 1 丙酮( CH3C OCH3) : 分析純，重蒸。
3.2 石油酪：沸程 30 "C ~60·c, 分析純，重蒸。
3.3 乙酸乙酷( CH3 CO  OC2 比  ）：分 析純，重蒸。
3.4 環(huán)己燒( C6 H12) : 分析純，重蒸。
3.5 正已燒( n心 H心 ：分析純，重蒸。
3.6 氯化鈉( NaC l) : 分析純。
3. 7 無水硫酸鈉( Na2 S0 4) : 分 析純，將無水硫酸鈉置干燥 箱中，于 120 °C 干燥 4 h, 冷卻后，密閉保存。
3.8 聚苯乙烯凝膠(Bio-Beads S-X3) : 200 目~ 400 目 ，或同類產(chǎn)品 。
3.9 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品： a-六六六(a- HCH ) 、六氯苯( HCB) 、f3-六六六 (/3-H C H) 、Y-六六六 ( Y- HCH ) 、五氯硝基苯(PCNB)、8-六六六 (8- HCH ) 、五氯苯胺( PCA) 、七氯 ( Heptachlor ) 、五硫酪 ( PCPs ) 、( Aldrin) 、氧氯丹( Oxychlordane) 、環(huán)氧七氯 ( Heptachlor epoxide 入反氯丹( tra ns-chlordane) 、a-硫丹(a-endos ulfan) 、順氯 丹 ( cis-chlordane ) 、p , p '- 滴滴伊 ( p , p '-DDE ) 、 ( Dieldrin ) 、異
( Endrin) 、f3-硫丹 ( /3-endos ulf an) 、p , p '- 滴滴滴( p , p'-DDD) 、a , p '- 滴滴涕( o, p '-DDT 汃異陛

(Endrin aldehyde入硫丹硫 酸鹽( Endos ul fan sul fate) 、p , p '- 滴滴涕( p , p '-DDT 入異酮( Endrin

ketone) 、滅蟻靈( Mirex) , 純度均應(yīng)不低于 98 %。
3. 10 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：分別準(zhǔn)確稱取或量取上述農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品適量，用少量苯溶解，再用正已燒稀釋成 一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。量取適量標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，用正已燒稀釋為系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。
 
4 儀器
 
4. 1 氣相色譜儀(GC) : 配有電子捕獲檢測器( ECD) 。
4.2 凝膠凈化柱：長 30 cm, 內(nèi)徑 2. 3 cm~2. 5 cm 具活塞玻璃層析柱，柱底墊少許 玻璃棉。用洗脫劑乙酸乙酣－環(huán)己燒Cl+ l) 浸泡的凝膠，以濕法裝入柱中 ，柱床高約 26 cm, 凝膠始終保待在洗脫劑中。
4.3 全自動凝膠色譜 系統(tǒng)：帶有固定波長( 254  nm) 紫外檢測器 ，供選擇使用。
4.4 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。
4.5 組織勻漿器。
4.6 振蕩器。
4. 7 氮?dú)鉂饪s器。
5 分析步驟
 
5. 1 試樣制備
蛋品去殼，制成勻漿；肉品去筋后，切成小塊，制成肉糜；乳品混勻待用。
5.2 提取與分配
5. 2. 1 蛋類：稱取試樣 20 g ( 精確到 0. 01 g) 千 200 mL 具塞三角瓶中，加水 5 mL ( 視試樣水分含量加水，使總水量約為 20  g。通常鮮蛋水分 含量約 75 % , 加水 5 mL 即可），再加入 40  mL 丙酮，振搖 30 min后，加入氯化鈉 6 g, 充分搖勻，再加入 30 mL 石油酪，振搖 30 min。靜 置分層后，將有機(jī)相全部轉(zhuǎn)移至100 mL 具塞三角瓶中經(jīng)無水 硫酸鈉干燥 ，并歉取 35 mL 于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，濃縮至約 1 mL, 加入 2  mL 乙酸乙酣－環(huán)己燒Cl+  l)  溶液再濃縮，如此重復(fù) 3 次，濃縮至約 1  mL, 供凝膠色譜層析凈化使用，或?qū)饪s液轉(zhuǎn)移至全自動凝膠 滲透色譜系統(tǒng) 配套的進(jìn)樣試管中，用乙酸乙酷－環(huán)己燒Cl+ l)  溶液洗滌旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶數(shù)次，將洗滌液合并 至試管中，定容至 10 mL。
5. 2.2 肉類：稱取試樣 20 g ( 精確到 0. 01 g), 加水15 mL ( 視試樣水分含量加水，使總水量約 20 g ) 。加
40 mL 丙酮，振搖 30 min,以下按照 5. 2. 1 蛋類試樣的提取、分配步驟處理。
5.2.3 乳類：稱取試樣 20 g( 精確到o. 01 g), 鮮乳不需加水，直接加丙酮提取。以下按照 5. 2. 1 蛋類試樣的提取、分配步驟處理。
5.2.4 大豆油：稱取試樣 1 g ( 精確到 0. 01 g), 直接加入 30 mL 石油酪，振搖 30  min 后，將有機(jī)相全部轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶 中，濃縮至約 1 mL, 加 2 mL 乙酸乙酣－環(huán)己燒Cl+  l)  溶液再濃縮，如此重復(fù) 3 次，濃縮至約   1      mL,    供凝膠色譜層析凈化使用，或?qū)饪s液轉(zhuǎn)移至全自動凝膠滲透色譜系統(tǒng)配套的進(jìn)樣試管中，用乙酸乙百護(hù)環(huán)己 燒Cl+ l) 溶液洗滌旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶數(shù)次，將洗滌液合并 至試管中，定容至 10 mL 。
5.2.5 植物類：稱取試樣勻漿 20 g, 加水 5 mL ( 視其水分含量加水，使總 水量約 20 mL), 加丙酮40 mL, 振蕩 30 min, 加氯化鈉 6 g, 搖勻。加石油酪 30 mL, 再振蕩 30 min , 以下按照 5. 2. 1 蛋類試樣的提取、分配步驟處理。
5.3 凈化
選擇手動或全自動凈化方法的任何一種進(jìn)行。
5. 3. 1 手動凝膠色譜柱凈化：將試樣濃縮液經(jīng)凝膠柱以乙酸乙百昔環(huán)己 燒Cl+ D 溶液洗脫，棄去 0 mL~ 35 mL 流分 ，收集 35 mL~70 mL 流分。將其旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至約 1 mL, 再經(jīng)凝膠柱凈化收集 35 mL~ 70 mL流分，蒸發(fā)濃縮，用氮?dú)獯党軇?，用正已燒定容至 1 mL, 留待 GC 分析。
5.3.2  全自動凝膠滲透色譜系統(tǒng)凈化：試 樣由 5 mL 試樣環(huán)注入凝膠滲透色譜( GPC) 柱，泵流速
5. 0 mL/min, 以乙酸乙酣－環(huán)己燒Cl+  D 溶液洗脫，棄去 0 min~7. 5 min 流分，收集 7. 5 min~15 min
流分，1 5 min~20 min 沖洗 GPC 柱。將收集的流分旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至約 1 mL, 用氮?dú)獯抵两?，用正已燒定容?1 mL, 留待 GC 分析。
5.4 測定
5. 4. 1 氣相色譜參考條件
5. 4. 1. 1 色譜柱： DM-5 石英彈性毛細(xì)管柱 ，長 30 m、內(nèi)徑0. 32 mm 、膜厚0. 25 p.m; 或等效柱。
5.  4. 1. 2 柱溫：程序升溫

90°CC1  min)40  •c  /m   in   l 70  •c2  ·3  •c  / m  in  230 °C (l 7    min)40•c/min280°C(5 min)

5. 4. 1. 3 進(jìn)樣口溫度： 280 "C 。 不分流進(jìn)樣 ，進(jìn)樣量 1 µ.L。
5. 4. 1. 4 檢測器：電子捕獲檢測器 ( ECO) , 溫度 300 ·c 。
5. 4. 1. 5 載氣流速：氮?dú)釩 N2 汃流速 1 mL/min; 尾吹，25 mL/ min 。
5. 4. 1. 6 柱前壓： 0. 5 MPa。
5.4.2 色譜分析
分別吸取 1 µ.L 混合標(biāo)準(zhǔn)液及試樣凈 化液注入氣相色譜儀中，記錄色譜圖 ，以保留時間定性，以試樣和標(biāo)準(zhǔn)的峰高或峰面積比較定量。