關(guān)于雙倒置選擇層光照明顯微鏡(diSPIM)配置
ASI提供所有必需的硬件來實(shí)現(xiàn)diSPIM,這是一種靈活且易于使用的選擇性層光照明顯微鏡(SPIM)實(shí)現(xiàn),允許樣品的雙視圖(d)安裝在倒置(i)顯微鏡。diSPIM的頭部裝置可以安裝在各種倒置顯微鏡上,包括ASI的RAMM框架。
diSPIM在蓋玻片上培養(yǎng)的細(xì)胞上進(jìn)行測試,細(xì)胞包埋在膠原凝膠上,c.線蟲和斑馬魚胚胎以及許多其他樣品。
單面系統(tǒng)(iSPIM)
從一個(gè)物鏡創(chuàng)建并使用其他物鏡成像的層面。層面通過樣品移動(dòng),通常通過使用與移動(dòng)成像物鏡的壓電臺(tái)同步的掃描儀(振鏡)移動(dòng)層面。
優(yōu)點(diǎn):速度快、成本低、設(shè)置簡單。
缺點(diǎn): XY 軸分辨率比 Z軸分辨率更好。
雙面系統(tǒng)(diSPIM)
雙方都有層面掃描儀,壓電物鏡定位器和相機(jī)。在實(shí)驗(yàn)過程中,從兩個(gè)視圖中收集圖像,并且可以將兩個(gè)數(shù)據(jù)集進(jìn)行計(jì)算合并以產(chǎn)生具有各向同性分辨率的三維數(shù)據(jù)集。如果需要可以在單面模式下操作。
優(yōu)點(diǎn):XY和Z分辨率都非常好 – 速度和分辨率的組合,這是活細(xì)胞成像的。
缺點(diǎn):購買更多硬件。數(shù)據(jù)后處理需要各向同性分辨率。
技術(shù)參數(shù)
視場* | > 400μm對(duì)角線 |
分辨率* | 380nm XYZ @ 500 nm波長 |
樣品尺寸* | 無限的扁平樣品,半徑高達(dá)3.5毫米半球 *取決于物鏡; 這些適用于 Nikon 40x/0.8WD。 |
安裝 | 蓋玻片或培養(yǎng)皿 |
成像深度 | 受散射限制,取決于樣品通常為30-150微米 |
軟件 | 各種免費(fèi)/開源和專業(yè)軟件 |
光操控 | 可用倒置顯微鏡物鏡 |
孵化 | 25-40°C的CO2和濕度控制(其他可能) |
兼容相機(jī) | 任何帶外部觸發(fā)的sCMOS |
兼容的激光 | 任何TTL控制(雙光纖輸出) |
采集模式 | 同步切片/壓電,平臺(tái)掃描,固定片 |
多維采集 | 以下任何組合:時(shí)間點(diǎn),多位置,多色(最多4個(gè)) |