（一）液相色譜分析實(shí)驗(yàn)室的概述
主要體現(xiàn)在高效率分離，對(duì)復(fù)雜的有機(jī)化合物分離制取純凈化合物，定量分析和定性分析，儀器設(shè)備主要有：高效液相色譜儀，適宜于高沸點(diǎn)化合物、難揮發(fā)化合物、熱不穩(wěn)定化合物、離子化合 物、高聚物等，彌補(bǔ)氣相色譜儀的不足。環(huán)境和實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)裝備設(shè)計(jì)要求與氣相色諳室相近。液相色譜法是指流動(dòng)相為液體的技術(shù)。早期的液相色譜（經(jīng)典液相色譜）是將小體積的試液注入色譜 柱上部，然后用洗脫液（流動(dòng)相）洗脫。這種經(jīng)典色譜法，流動(dòng)相依靠自身的重力穿過色譜柱，柱效差(固定相顆粒不能太小)，分離時(shí)間很長(zhǎng)。70年代初期發(fā)展起來的高效液相色譜法，克服了經(jīng)典液相色譜法柱效低，分離時(shí)間很長(zhǎng)的缺點(diǎn)。成為一種高效、快速的分離技術(shù)。高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上，引用了氣相色譜的理論，在技術(shù)上，流動(dòng)相改為高壓輸送（***高輸送壓力可達(dá)4.9´107 Pa）;色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜（每米塔板數(shù)可達(dá)幾萬或幾十萬）；同時(shí)柱后連有高靈敏度的檢測(cè)器，可對(duì)流出物進(jìn)行連續(xù)檢測(cè) 。
（二）高效液相色譜分析法的特點(diǎn)
1.高壓：液相色譜法以液體為流動(dòng)相（稱為載液），液體流經(jīng)色譜柱，受到阻力較大，為了迅速地 通過色譜柱，必須對(duì)載液施加高壓。一般可達(dá)150～350×105 Pa。
2.高速：流動(dòng)相在柱內(nèi)的流速較經(jīng)典色譜快得多，一般可達(dá)1～10ml/min。高效液相色譜法所需的分析時(shí)間較之經(jīng)典液相色譜法少得多，一般少于1h 。
3.高效：近來研究出許多新型固定相，使分離效率大大提高。
4.高靈敏度：高效液相色譜已廣泛采用高靈敏度的檢測(cè)器，進(jìn)一步提高了分析的靈敏度。如熒光檢 測(cè)器靈敏度可達(dá)10-11 g。另外，用樣量小，一般幾個(gè)微升。
5.適應(yīng)范圍寬：氣相色譜法與高效液相色譜法的比較：氣相色譜法雖具有分離能力好，靈敏度高，分析速度快，操作方便等優(yōu)點(diǎn)，但是受技術(shù)條件的限制，沸點(diǎn)太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)都難于應(yīng)用氣相色譜法進(jìn)行分析。而高效液相色譜法，只要求試樣能制成溶液，而不需要?dú)饣?，因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對(duì)于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、相對(duì)分子量大（大于 400 以上）的有機(jī)物（這些物質(zhì)幾乎占有機(jī)物總數(shù)的 75% ～ 80% ）原則上都可應(yīng)用高效液相色譜法來進(jìn)行分離、分析。 據(jù)統(tǒng)計(jì)，在已知化合物中，能用氣相色譜分析的約占20%，而能用液相色譜分析的約占70～80%。
（三）檢測(cè)器
(1)紫外光度檢測(cè)器
它的作用原理是基于被分析試樣組分對(duì)特定波長(zhǎng)紫外光的選擇性吸收，組分濃度與吸光度的關(guān)系遵守 比爾定律。***常用的檢測(cè)器，應(yīng)用***廣，對(duì)大部分有機(jī)化合物有響應(yīng)。
特點(diǎn)：
a.靈敏度高：其***小檢測(cè)量10-9g·mL-1 ，故即使對(duì)紫外光吸收很弱的物質(zhì)，也可以檢測(cè)；
b. 線性范圍寬；(比爾定律)
c. 流通池可做的很?。?mm × 10mm ，容積 8μL）；
d. 對(duì)流動(dòng)相的流速和溫度變化不敏感,可用于梯度洗脫；
e. 波長(zhǎng)可選，易于操作:如，使用裝有流通池的可見紫外分光光度計(jì)（可變波長(zhǎng)檢測(cè)器）。
缺點(diǎn)：對(duì)紫外光不吸收的試樣不能檢測(cè)；同時(shí)溶劑的選擇受到限制。
(2)光電二極管陣列檢測(cè)器
紫外檢測(cè)器的重要進(jìn)展；陣列由1024個(gè)光電二極管陣列，每個(gè)光電二極管寬僅50μm，各檢測(cè)一窄段波 長(zhǎng)。如圖所示，在檢測(cè)器中，光源發(fā)出的紫外或可見光通過液相色譜流通池，在此流動(dòng)相中的各個(gè)組分進(jìn)行特征吸收，然后通過狹縫，進(jìn)入單色其進(jìn)行分光，***后由光電二極管陣列檢測(cè)，得到各個(gè)組分的吸收信號(hào)。經(jīng)計(jì)算機(jī)快速處理，得三維立體譜圖。
(3)熒光檢測(cè)器
熒光檢測(cè)器是一種高靈敏度、高選擇性檢測(cè)器。對(duì)多環(huán)芳烴，、、卟啉類化合物、農(nóng)藥、藥物、氨基酸、甾類化合物等有響應(yīng).熒光檢測(cè)器的結(jié)構(gòu)及工作原理和熒光光度計(jì)相似。
(4)差示折光檢測(cè)器
除紫外檢測(cè)器之外應(yīng)用***多的檢測(cè)器。 差示折光檢測(cè)器是借連續(xù)測(cè)定流通池中溶液折射率的方法來測(cè)定試樣濃度的檢測(cè)器。溶液的折射率是純?nèi)軇鲃?dòng)相）和純?nèi)苜|(zhì)（試樣）折射率乘以各物質(zhì)的濃度之和。因此溶有試樣的流動(dòng)相和純流動(dòng)相之間折射率之差表示試樣在流動(dòng)相中的濃度。
(5)電導(dǎo)檢測(cè)器
其作用原理是根據(jù)物質(zhì)在某些介質(zhì)中電離后所產(chǎn)生電導(dǎo)變化來測(cè)定電離物質(zhì)含量。
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