測序用 Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆試劑盒可提供高效、5 分鐘的一步克隆策略，用于將校正性聚合酶–擴增平末端 PCR 產(chǎn)物直接插入質(zhì)粒載體中以進行測序。每個試劑盒均使用含經(jīng)過特殊設(shè)計的測序引物位點（可從各反應(yīng)中獲得更多的插入序列和更少的載體序列）的 pCR™4Blunt-TOPO™ 載體（參見圖）。這些試劑盒包括克隆和選擇包含您 PCR 片段的重組載體所需的所有物品。
pCR™4Blunt-TOPO™ 載體—針對測序進行優(yōu)化
我們從 pCR™4Blunt-TOPO™ 載體中刪除了大量的多克隆位點，以將測序引物位點與插入位點之間的距離縮短至 33 bp。這意味著測序反應(yīng)具有更少的載體序列和更多的插入序列。pCR™4Blunt TOPO™ 載體具有 4 種常見測序引物的位點：M13 正向、M13 反向、T7 和 T3。該試劑盒包括各等份試液。
pCR™4Blunt-TOPO™ 克隆選擇和操作
pCR™4Blunt-TOPO™ 載體包含氨芐和抗性標記物以及用于陽性選擇的 LacZα-ccdB 基因融合。載體的盡可能減少的化多克隆位點仍包括用于克隆 PCR 產(chǎn)物簡化切除的旁側(cè) EcoRI 位點和用于在測序前生成嵌套缺失的 Sse8387I 位點?！疶7 和 T3 啟動子也用于體外轉(zhuǎn)錄。
簡化的基于 TOPO™ 的克隆
使用 TOPO 克隆技術(shù)，無需使用含有特異性序列的 PCR 引物、PCR 后程序、載體制備或其他耗時長的 DNA 操作步驟。™只需將 PCR 反應(yīng)物直接添加至提供的拓撲異構(gòu)酶帶電載體中，孵育 5 分鐘，并使用提供的大腸桿菌感受態(tài)細胞進行轉(zhuǎn)化。
高效克隆
攜帶所需插入片段的克隆高達 95%，您可以篩選更少的克隆體，節(jié)省時間和成本。該試劑盒中使用的 pCR™4Blunt-TOPO™ 載體無突出端，用于高效連接由校正性耐熱聚合酶（可留下平末端 PCR 產(chǎn)物）產(chǎn)生的 PCR 產(chǎn)物。
克隆標準
在克隆方面，TOPO™ 克隆技術(shù)已作為一種可靠技術(shù)供成千上萬的科學(xué)家使用達十余年?？焖佟⒑唵我子们腋咝У?TOPO™ 克隆已在多種應(yīng)用中應(yīng)用于多種不同載體。
測序用 Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆試劑盒—試劑盒規(guī)格
根據(jù)您的需求，測序用 Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆試劑盒可與可提供不同優(yōu)勢的多種感受態(tài)細胞一起購買：
• 一般克?。? 細胞（貨號K2875-J10、K2875-20、K2875-40）
• 高效克?。? Electrocomp™ 細胞（貨號號 K2880-20、K2880-40）
• 一般克隆，噬菌體 T1 抗性：DH5α-T1R（貨K2895-20）
• 快速生長：Mach1™-T1R 化學(xué)感受態(tài)大腸桿菌（貨號 K2835-20）
相關(guān)鏈接
• 定制載體構(gòu)建和克隆服務(wù)
• 質(zhì)粒 DNA 純化試劑盒選擇指南
• PCR 試劑、儀器和用品
pCR™4Blunt-TOPO™ 載體—針對測序進行優(yōu)化
我們從 pCR™4Blunt-TOPO™ 載體中刪除了大量的多克隆位點，以將測序引物位點與插入位點之間的距離縮短至 33 bp。這意味著測序反應(yīng)具有更少的載體序列和更多的插入序列。pCR™4Blunt TOPO™ 載體具有 4 種常見測序引物的位點：M13 正向、M13 反向、T7 和 T3。該試劑盒包括各等份試液。
pCR™4Blunt-TOPO™ 克隆選擇和操作
pCR™4Blunt-TOPO™ 載體包含氨芐和抗性標記物以及用于陽性選擇的 LacZα-ccdB 基因融合。載體的盡可能減少的化多克隆位點仍包括用于克隆 PCR 產(chǎn)物簡化切除的旁側(cè) EcoRI 位點和用于在測序前生成嵌套缺失的 Sse8387I 位點?！疶7 和 T3 啟動子也用于體外轉(zhuǎn)錄。
簡化的基于 TOPO™ 的克隆
使用 TOPO 克隆技術(shù)，無需使用含有特異性序列的 PCR 引物、PCR 后程序、載體制備或其他耗時長的 DNA 操作步驟。™只需將 PCR 反應(yīng)物直接添加至提供的拓撲異構(gòu)酶帶電載體中，孵育 5 分鐘，并使用提供的大腸桿菌感受態(tài)細胞進行轉(zhuǎn)化。
高效克隆
攜帶所需插入片段的克隆高達 95%，您可以篩選更少的克隆體，節(jié)省時間和成本。該試劑盒中使用的 pCR™4Blunt-TOPO™ 載體無突出端，用于高效連接由校正性耐熱聚合酶（可留下平末端 PCR 產(chǎn)物）產(chǎn)生的 PCR 產(chǎn)物。
克隆標準
在克隆方面，TOPO™ 克隆技術(shù)已作為一種可靠技術(shù)供成千上萬的科學(xué)家使用達十余年?？焖佟⒑唵我子们腋咝У?TOPO™ 克隆已在多種應(yīng)用中應(yīng)用于多種不同載體。
測序用 Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆試劑盒—試劑盒規(guī)格
根據(jù)您的需求，測序用 Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆試劑盒可與可提供不同優(yōu)勢的多種感受態(tài)細胞一起購買：
• 一般克?。? 細胞（貨號K2875-J10、K2875-20、K2875-40）
• 高效克?。? Electrocomp™ 細胞（貨號號 K2880-20、K2880-40）
• 一般克隆，噬菌體 T1 抗性：DH5α-T1R（貨K2895-20）
• 快速生長：Mach1™-T1R 化學(xué)感受態(tài)大腸桿菌（貨號 K2835-20）
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For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
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