亞克隆用 TOPO™ TA Cloning™ 試劑盒，不含感受態(tài)細(xì)胞

亞克隆用 TOPO™ TA Cloning™ 試劑盒可提供高效、5 分鐘的一步克隆策略（“TOPO™ 克隆”），用于將 Taq 聚合酶–擴(kuò)增 PCR 產(chǎn)物直接插入一個(gè)質(zhì)粒載體上以進(jìn)行亞克隆。每個(gè)試劑盒使用含便利限制性位點(diǎn)的 pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體進(jìn)行亞克隆。根據(jù)您的需要和預(yù)算，您可選擇含多種感受態(tài)細(xì)胞或不含感受態(tài)細(xì)胞的克隆試劑盒。用于亞克隆的 TOPO™ TA 克隆™試劑盒的特點(diǎn)：

•快速且簡(jiǎn)便—從 PCR 至克隆僅需3步，手動(dòng)操作時(shí)間短至5分鐘
• 高效—可獲得高達(dá) 95% 含正確插入片段的克隆
• 久經(jīng)考驗(yàn)—在過去十余年中性能可靠，引用次數(shù)超過4,000次
• 簡(jiǎn)單—不需要連接酶、PCR 后程序或含有特異性序列的 PCR 引物

用于亞克隆的 TOPO™ TA Cloning™ 試劑盒—概述

• 載體：pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體—含15個(gè)便利限制性位點(diǎn)（位于您插入片段側(cè)翼）的亞克隆載體，可輕松實(shí)現(xiàn)定向亞克隆
• 克隆方法：TOPO™ TA Cloning™ —含 3′-A 突出端（Taq 聚合酶擴(kuò)增）的 PCR 產(chǎn)物與含 T 突出端的 TOPO™ 載體基于拓?fù)洚悩?gòu)酶 I 進(jìn)行5分鐘連接–
• 感受態(tài)細(xì)胞：多種選項(xiàng)—從包含一般、高效、噬菌體 T1 抗性或快速生長(zhǎng)型感受態(tài)細(xì)胞的試劑盒中選擇或使用您的自有細(xì)胞–

pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體—簡(jiǎn)化克隆和亞克隆
pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體使用 3'-胸苷 (T) 突出端進(jìn)行線性化以直接連接 Taq 聚合酶–擴(kuò)增 PCR 產(chǎn)物 (TA cloning™)，并使用共價(jià)結(jié)合拓?fù)洚悩?gòu)酶 I 進(jìn)行“活化”。無需添加連接酶，在5分鐘內(nèi)即可完成克隆。位于 PCR 產(chǎn)物插入位點(diǎn)側(cè)翼的 EcoRI 位點(diǎn)，可實(shí)現(xiàn)插入片段的簡(jiǎn)便切除或使用任何位于 PCR 插入片段側(cè)翼的 15 個(gè)便利限制性位點(diǎn)的任意組合，可輕松實(shí)現(xiàn)定向亞克隆。

pCR™ 2.1-TOPO™ TA 克隆選擇和操作
pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體包含氨芐和抗性標(biāo)記物以及用于藍(lán)/白斑篩選的 LacZα 基因。

簡(jiǎn)化的基于 TOPO™ 的克隆
使用 TOPO™ 克隆技術(shù)，無需使用含有特異性序列的 PCR 引物、PCR 后程序、載體制備或其他耗時(shí)長(zhǎng)的 DNA 操作步驟。只需將 PCR 反應(yīng)產(chǎn)物直接添加至提供的拓?fù)洚悩?gòu)酶帶電載體中，孵育 5 分鐘，并使用大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化。

高效克隆
攜帶所需插入片段的克隆高達(dá) 95%，您可以篩選更少的克隆體，從而節(jié)省時(shí)間和成本。該試劑盒中使用的 pCR™ 2.1-TOPO™ TA 載體含有 3'-T 突出端，用于高效連接含 3'-A 突出端的 Taq 聚合酶–擴(kuò)增 PCR 產(chǎn)物。

克隆標(biāo)準(zhǔn)
在克隆方面，TOPO™ 克隆技術(shù)已作為一種可靠技術(shù)供成千上萬的科學(xué)家使用達(dá)十余年?？焖佟⒑?jiǎn)單易用且高效的 TOPO ™克隆已在多種應(yīng)用中應(yīng)用于多種不同載體。

用于亞克隆的TOPO™ TA 克隆™試劑盒—試劑盒選項(xiàng)
根據(jù)您的需求，測(cè)序用 TOPO™ TA 克隆™試劑盒可與提供不同優(yōu)勢(shì)的多種感受態(tài)細(xì)胞一起購買：

• 一般克?。? 細(xì)胞（貨號(hào)K4500-01、K4500-40）
•高效克?。? Electrocomp™ 細(xì)胞（貨號(hào)號(hào) K4560-01、K4560-40）
• 一般克隆，噬菌體 T1 抗性：DH5α-T1R 細(xì)胞（貨號(hào) K4520-01、K4520-40）
• 快速生長(zhǎng)：Mach1™ -T1R 化學(xué)感受態(tài)大腸桿菌（貨號(hào) K4510-20）
• 自行提供：靈活性高且可節(jié)省成本（貨號(hào) 450641）

我們還提供2個(gè)版本的試劑盒，包括 PureLink™ 快速質(zhì)粒小提試劑盒（貨號(hào) K4500-02 和 K4510-02）用于分離清潔、已完成測(cè)序的重組質(zhì)粒。