酶切試劑盒

樣品制備是蛋白質(zhì) MS 分析中較復(fù)雜、較耗時的步驟之一，且樣品提取和制備的質(zhì)量和重現(xiàn)性對結(jié)果有顯著影響。有時，需要采取額外步驟來提高樣品質(zhì)量，包含從 SDS-PAGE 凝膠中酶切和回收肽片段，或進(jìn)行肽胍基化以改善序列覆蓋范圍。每種試劑盒均經(jīng)過優(yōu)化，以產(chǎn)生高質(zhì)量的肽酶切物，從而通過質(zhì)譜進(jìn)行可靠的蛋白質(zhì)組學(xué)分析。

Pierce 溶液內(nèi)酶切和胍基化試劑盒
Pierce 溶液法酶切和胍基化試劑盒提供了優(yōu)化的程序及可供約 90 份酶切物（每份含 0.025 至 10 µg 蛋白）使用的試劑。

• 全面酶切—可全面酶切 0.025-10 µg 范圍內(nèi)的蛋白（～90 次反應(yīng)）
• 特異性—胍基化反應(yīng)幾乎不會產(chǎn)生 N 端修飾
• 便利—試劑盒包括用于酶切、還原、烷基化和胍基化的試劑
• 高效—一天內(nèi)即可完成蛋白的酶切和胍基化

可特異性切割和賴氨酸殘基的羧基側(cè)肽鍵。由于較高堿性的側(cè)鏈，含的肽的信號通常更強(qiáng)。為了增強(qiáng)整體電離，胍基化將賴氨酸轉(zhuǎn)化為高，并且對賴氨酸的胺具有特異性，但肽 N 末端的胺反應(yīng)可能極輕微。這種衍生化會提高含賴氨酸的肽的強(qiáng)度并改善整體序列覆蓋率。

Pierce 膠內(nèi)酶切試劑盒
Pierce 膠內(nèi)酶切試劑盒提供了一整套試劑，用于在膠體考馬斯或熒光染料染色蛋白條帶上進(jìn)行約 150 次酶切。該試劑盒包括經(jīng)修飾的豬、脫色緩沖液、還原試劑、烷基化試劑和酶切緩沖液以及詳細(xì)而簡單的說明。

• 全面—包括蛋白凝膠脫色、還原、烷基化和酶切的所有必要試劑
• 穩(wěn)健—經(jīng)過優(yōu)化的程序和試劑可使用多種條件生成可靠的酶切物和數(shù)據(jù)
• 特異性—包含高純度和經(jīng)修飾的 MS 級，該不具有活性，具有極低程度的自溶活性

兩個關(guān)鍵的樣品制備步驟是將蛋白酶切成肽段，然后濃縮和純化肽段進(jìn)行質(zhì)譜分析。Pierce 膠內(nèi)酶切試劑盒可完成這些步驟中的步，從凝膠切片中提取蛋白質(zhì)樣品。Pierce C-18 離心柱和吸頭可完成第二步，純化 MS 即用型樣品。