Restore™ Western 印跡剝離緩沖液

Thermo Scientific Restore Western Blot抗體剝離緩沖液能夠安全高效地從硝化纖維膜和PVDF膜上清去除一抗和二抗，從而再次檢測化學(xué)發(fā)光的蛋白質(zhì)免疫印跡。

estore Western Blot抗體剝離緩沖液的特性：

•省時(shí)—不需重新制膠電泳
•節(jié)省珍貴樣品—在同一張膜上使用相同的樣品重新檢測
•高效—配方，去除效果好遠(yuǎn)優(yōu)于自制緩沖液
•溫和配方—在抗體剝離及重新檢測時(shí)不會(huì)對(duì)靶蛋白造成傷害
•無氣味—不含硫醇，無刺鼻氣味
•價(jià)格經(jīng)濟(jì)—比其他競爭廠商的剝離緩沖液價(jià)格更低

產(chǎn)品細(xì)節(jié)
進(jìn)行凝膠電泳并使用平行雙樣免疫印跡分析來檢測新的一抗或抗體濃度非常耗費(fèi)時(shí)間和金錢，而Restore Western Blot抗體剝離緩沖液可以消除使用化學(xué)發(fā)光免疫印跡底物檢測免疫印跡過程中的浪費(fèi)。Restore 抗體剝離緩沖液可以從免疫印跡中、高效地從去除一抗和二抗，而不會(huì)去除或破壞已固定抗原，從而使得印跡可以被清除，而抗原可以重新檢測，結(jié)果依然可靠。

使用Thermo Scientific SuperSignal辣根過氧化物酶底物進(jìn)行化學(xué)發(fā)光免疫印跡檢測，是當(dāng)前見、的方法。由于這些底物不會(huì)沉淀并與膜表面結(jié)合，因此化學(xué)發(fā)光法檢測到的免疫蛋白印跡可使用該試劑來剝離，從而移除親和結(jié)合的一抗和二抗。為了達(dá)到良好的效果，抗體剝離緩沖液需要具有足夠的強(qiáng)度來分離已結(jié)合的抗體，還需要足夠溫和使已轉(zhuǎn)移的標(biāo)靶蛋白仍保留在硝化纖維膜或PVDF膜上。Restore Western Blot 抗體剝離正具有這些特點(diǎn)。

通過剝離和重新檢測，我們無需為了對(duì)不同標(biāo)靶進(jìn)行檢測而進(jìn)行多次凝膠電泳，避免浪費(fèi)稀少或昂貴的樣品。一次凝膠電泳產(chǎn)生的一張膜可通過使用Restore Western Blot抗體剝離緩沖液來去除一抗從而消除印跡。印跡剝離僅需花費(fèi)15到30分鐘，具體時(shí)間因一抗的親和能力而不同。在去除印跡后，可使用新的一抗重新結(jié)合并檢測。另外，印跡剝離之后還可以使用調(diào)整后的抗體濃度來進(jìn)行重新結(jié)合，以便在初次結(jié)果不佳的情況下進(jìn)一步優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。

應(yīng)用
•可重復(fù)使用使用硝化纖維膜或PVDF膜，通過不同的一抗檢測不同標(biāo)靶
•可重新檢測印跡，改正或優(yōu)化初次實(shí)驗(yàn)中無效的抗體濃度

實(shí)驗(yàn)方案概要
•漂洗印跡以去除化學(xué)發(fā)光底物。
•37°C（對(duì)于某些抗體室溫即可）條件下，在Restore Western Blot抗體剝離緩沖液中孵育印跡5至15分鐘。
•移除免疫印跡并在洗滌緩沖液（TBS-T或PBS-T）中進(jìn)行清洗。
•測試抗體是否已充分移除。
•進(jìn)行下一次免疫印跡實(shí)驗(yàn)。