螢火蟲熒光素酶輝光檢測試劑盒的特點:
•靈敏—對螢火蟲熒光素酶活性進行高度靈敏的檢測;為了獲得較好結(jié)果(較大信號),請與 Pierce 螢火蟲熒光素酶信號增強劑配合使用
• 穩(wěn)定—與閃光測定相比,信號穩(wěn)定性更高
• 簡單—不需要使用配備進樣器的光度計
• 兼容—與其他螢火蟲甲蟲熒光素酶兼容的測定試劑
• 適合自動化—適合用于高通量測定
• 便利—包含一種通用的細胞裂解緩沖液和經(jīng)過優(yōu)化的輝光測定試劑
• 安全—允許用戶執(zhí)行非放射性測定
該 Pierce 熒光素酶輝光檢測試劑盒包含的試劑用于測定細胞裂解物中螢火蟲熒光素酶的活性。在螢火蟲熒光素酶存在的情況下,輝光試劑提供穩(wěn)定的生物發(fā)光信號,非常適合不帶進樣器的光度計或用于樣品批量處理。熒光素酶反應(yīng)產(chǎn)生的光輸出可與生成的熒光素酶蛋白的量相關(guān),后者又與驅(qū)動熒光素酶表達的啟動子的活性成正比。這些輝光測定試劑經(jīng)過了優(yōu)化,可以為 Thermo Scientific 螢火蟲 Luc 質(zhì)粒提供較好結(jié)果;但是,閃光分析試劑盒可用于檢測采用 D-熒光素作為底物的其他螢火蟲或 ATP 依賴性熒光素酶的活性。
包括:
細胞裂解緩沖液、反應(yīng)緩沖液和底物;需單獨購買熒光素酶信號增強劑。
需要:
• 螢火蟲熒光素酶和光度計或其他能夠監(jiān)測發(fā)光的儀器(如 Thermo Scientific Luminoskan Ascent 和 Varioskan 閃光微孔板讀數(shù)儀)。
•為了獲得較好結(jié)果(較大信號),請與 Pierce 螢火蟲熒光素酶信號增強劑配合使用
應(yīng)用:
• 用于分析順式調(diào)節(jié)元素和反式作用因子的啟動子研究
• 藥物篩選
• siRNA 和 miRNA 篩選
• 研究脫靶效應(yīng)的多通路測定
• 蛋白定位報告基因測定
• 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路分析
• RNA 剪接研究
螢火蟲熒光素酶是由甲蟲螢科家族的多個種屬(包括 Photinus 屬和螢屬)天然產(chǎn)生的一種 60kDa 蛋白。螢火蟲熒光素酶的生物發(fā)光信號源自 D-熒光素的氧化。熒光素酶反應(yīng)產(chǎn)生的光輸出將使用光度計進行捕獲,可與生成的螢火蟲熒光素酶蛋白的量相關(guān),并可用于確定驅(qū)動螢火蟲表達的啟動子的活性。天然螢火蟲熒光素酶產(chǎn)生了快速衰變的強烈的閃光信號。使用 Pierce 螢火蟲輝光檢測試劑盒產(chǎn)生的信號更穩(wěn)定,并且衰變得非常慢,因此無需使用配備進樣器的光度計。