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Pierce 考馬斯蛋白檢測試劑盒是一種廣泛采用的檢測試劑的即用型配方,最初由 Bradford 在 1976 年描述。與蛋白溶液混合時,酸性考馬斯染料試劑的顏色以與樣品中存在的蛋白量成比例的方式從棕色變?yōu)樗{色。通過與通常制備作為牛血清白蛋白 (BSA) 或牛丙種球蛋白 (BGG) 的已知稀釋系列的蛋白檢測標準品的顏色響應(yīng)進行比較,進行蛋白測定。簡單程序適用于幾乎任何體積標度,包括試管、比色皿和微孔板。蛋白檢測與蛋白樣品中遇到的大多數(shù)鹽、溶劑、緩沖液、硫醇、還原性物質(zhì)和金屬螯合劑兼容。
考馬斯蛋白檢測試劑盒的特點包括:
•Bradford 試劑—經(jīng)典 Bradford 檢測試劑的穩(wěn)定、即用型試劑盒
•比色—使用標準分光光度計或酶標儀在 595 nm
下測定•易于使用—單一試劑;無需制備工作試劑
•快速—幾乎立即顯色;添加、混合和讀取結(jié)果
•檢測范圍—在 1 至 1500 µg/mL 檢測蛋白濃度
•靈活—提供且適用于幾種目標工作范圍的微孔板和試管方案
考馬斯 (Bradford) 測定試劑盒如何檢測蛋白
基于考馬斯染料 (Bradford) 的蛋白檢測中的顯色與蛋白中某種堿性氨基酸(主要是、賴氨酸和)的存在有關(guān)。范德華力和疏水作用也參與了蛋白質(zhì)和染料的結(jié)合。結(jié)合到每個蛋白質(zhì)分子上的考馬斯染料的數(shù)目大致與蛋白所帶正電荷的數(shù)量成正比。游離氨基酸、肽和低分子量蛋白質(zhì)不會與考馬斯染料試劑產(chǎn)生顏色。一般而言,肽或蛋白的質(zhì)量必須至少為 3,000 道爾頓才能夠使用該試劑檢測到。
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