現(xiàn)貨供應(yīng)-人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽（PACAP）ELISA 試劑盒
Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit
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人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽（PACAP）ELISA試劑盒
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ELISA步驟
1.包被
通過(guò)考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定濃度后，用槍吹勻。按照實(shí)際使用量配制包被抗原量，包被濃度>10ug/ml,（蛋白如有不溶，滴加10%SDS后吹勻） 4攝氏度包被過(guò)夜，
2.洗板
包被完的板子，洗板一次，于吸水紙上拍干
3.封閉
200ul 封閉液/孔， 4攝氏度過(guò)夜，或者37度封閉2小時(shí)
4.洗板
封閉完的板子，洗板一次，于吸水紙上拍干
5.加一抗
加血清，以及純化的抗體，37度孵育1小時(shí)
6.洗板
洗板三次以上，于吸水紙上拍干
7.加二抗
加入羊抗兔二抗1：20000，37度孵育1小時(shí)
8.洗板
洗三次以上，于吸水紙上拍干，同時(shí)，配置好顯色液（TMB）
9.顯色
準(zhǔn)備好終止液后，加入顯色液100ul/孔，可以晃動(dòng)板子加速顯色過(guò)程。
TMB顯色，到一定程度時(shí)（一般不能讓空白和陰性顯色太高），加入50ul/孔終止液，加入終止液后需要靜置10min以上，使終止*、顏色均一（可以晃動(dòng)板子加速終止過(guò)程），終止后讀數(shù)
讀數(shù)，酶標(biāo)儀必須預(yù)熱30min以上；TMB顯色檢測(cè)波長(zhǎng)為：450/630
zui后，打開(kāi)相應(yīng)的酶標(biāo)儀測(cè)量軟件，讀數(shù)。講數(shù)據(jù)存儲(chǔ)到位置并完善數(shù)據(jù)。
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