現(xiàn)貨供應(yīng)-人胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒
Human placenta growth factor,PLGF ELISA kit
ELISA步驟
1.包被
通過考馬斯亮藍法測定濃度后,用槍吹勻。按照實際使用量配制包被抗原量,包被濃度>10ug/ml,(蛋白如有不溶,滴加10%SDS后吹勻) 4攝氏度包被過夜,
2.洗板
包被完的板子,洗板一次,于吸水紙上拍干
3.封閉
200ul 封閉液/孔, 4攝氏度過夜,或者37度封閉2小時
4.洗板
封閉完的板子,洗板一次,于吸水紙上拍干
5.加一抗
加血清,以及純化的抗體,37度孵育1小時
6.洗板
洗板三次以上,于吸水紙上拍干
7.加二抗
加入羊抗兔二抗1:20000,37度孵育1小時
8.洗板
洗三次以上,于吸水紙上拍干,同時,配置好顯色液(TMB)
9.顯色
準備好終止液后,加入顯色液100ul/孔,可以晃動板子加速顯色過程。
TMB顯色,到一定程度時(一般不能讓空白和陰性顯色太高),加入50ul/孔終止液,加入終止液后需要靜置10min以上,使終止*、顏色均一(可以晃動板子加速終止過程),終止后讀數(shù)
讀數(shù),酶標儀必須預(yù)熱30min以上;TMB顯色檢測波長為:450/630
zui后,打開相應(yīng)的酶標儀測量軟件,讀數(shù)。講數(shù)據(jù)存儲到位置并完善數(shù)據(jù)。
人胎盤生長因子,人PLGF,人ELISA試劑盒報價 北京
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