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貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS632179 | 超氧陰離子清除能力測(cè)試盒(比色法) | 100管/96樣 |
AS632179 | 超氧陰離子清除能力測(cè)試盒(比色法) | 50管/48樣 |
注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機(jī)體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。
測(cè)定原理
AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-與對(duì)氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對(duì)超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負(fù)相關(guān)。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體1.5mL×1支,4℃避光保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加6mL蒸餾水充分溶解。
試劑三:液體7.5mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體7.5mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體7.5mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理
組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測(cè)。
粉劑藥物可配制成相同濃度,比如1mg/mL。
測(cè)定操作
對(duì)照管 | 測(cè)定管 | |
試劑一(μL) | 10 | 10 |
試劑二(μL) | 40 | 40 |
H2O(μL) | 25 | |
充分混勻,25℃反應(yīng)1min | ||
樣品(μL) | 25 | |
試劑三(μL) | 50 | 50 |
充分混勻,37℃反應(yīng)30min | ||
試劑四(μL) | 50 | 50 |
試劑五(μL) | 50 | 50 |
充分混勻,37℃顯色20min,于微量石英比色皿/96孔板,在530nm處測(cè)定對(duì)照管和測(cè)定管的吸光值,分別記為A對(duì)照管和A測(cè)定管。 |
注意:對(duì)照管只需測(cè)定一次。
計(jì)算公式
超氧陰離子清除率 I%=
注意事項(xiàng)
試劑一4℃可保存2個(gè)月,配制好的試劑二4℃可保存一周,建議實(shí)驗(yàn)前配制,并盡快使用。
樣品處理完后立即進(jìn)行測(cè)定,或者低溫保存不超過(guò)24小時(shí)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
cath-D ELISA Kit | Ⅵ型膠原α3ELISA試劑盒 |
anti-hepatitis D virus antibody,anti-HDV ELISA Kit | B細(xì)胞活化因子受體ELISA試劑盒 |
ATPmeiELISA試劑盒 | c-Jun氨基末端激mei/應(yīng)急激活的蛋白meiELISA試劑盒 |
CD146分子ELISA試劑盒 | EB病毒衣殼抗原ELISA試劑盒 |
大鼠磷suan化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒 | 大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒 ELISA |
乙酰酯mei關(guān)聯(lián)蛋白ELISA試劑盒 | 雞透明質(zhì)suan(HA)檢測(cè)試劑盒elisa |
人白介su17(IL-17)ELISA試劑盒 | Cullin5蛋白ELISA試劑盒 |
豬瘦su(LEP)試劑盒elisa | 綿羊皰疹病毒2型PCR試劑盒 |
海德堡沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 同豬生殖與呼吸綜合癥病毒歐洲株PCR檢測(cè)試劑盒 |
鼻病毒RT-PCR試劑盒 | 鼠肺炎病毒RT-PCR試劑盒 |
結(jié)核分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 漢坦病2型RT-PCR試劑盒 |
腐敗希瓦菌PCR檢測(cè)試劑盒 | AFU 大鼠αL巖藻糖苷ELISA檢測(cè)試劑盒 |
BF 大鼠B因子ELISA檢測(cè)試劑盒 | 海豚鏈球菌(StI)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 | 同禽病毒性關(guān)節(jié)炎病毒禽腱鞘炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 |
伊默菌su(EMD)ELISA試劑盒 | BA 人封閉抗體ELISA檢測(cè)試劑盒 |