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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS632181 | 二氫黃酮醇還原酶（DFR）測試盒（比色法） | 100管/48樣 |
AS632181 | 二氫黃酮醇還原酶（DFR）測試盒（比色法） | 50管/24樣 |
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
二氫黃酮醇還原酶是類黃酮合成途徑中的一個關鍵酶，在決定植物的花色、葉色、果色和其他經(jīng)濟器官的色澤及其營養(yǎng)品質(zhì)方面起著重要作用。
測定原理
二氫黃酮醇還原酶作用于二氫槲皮素產(chǎn)生兒茶素，可與縮合形成紅色化合物，在500nm處有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品
研缽、低溫離心機、震蕩儀、氮吹儀、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋、無水乙醇、乙酸乙酯。
試劑組成和配制
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體12mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體1.5mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加2mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑四：液體30mL×1瓶，4℃避光保存。
酶液提取
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。10000g ，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定操作表
分光光度計/酶標儀預熱30min，調(diào)節(jié)波長至500nm。
操作表
對照管 | 測定管 | |||
酶液（μL） | 40 | 40 | ||
試劑一（μL） | 140 | 120 | ||
試劑二（μL） | 20 | |||
試劑三（μL） | 20 | 20 | ||
混勻，30℃反應30min | ||||
乙酸乙酯（μL） | 200 | 200 | ||
37℃震蕩10min，取上層溶液，N2吹干 | ||||
無水乙醇（μL） | 100 | 100 | ||
充分震蕩 | ||||
試劑四(μL) | 300 | 300 | ||
混勻，25℃靜置10min，于微量石英比色皿/96孔板中測定500nm處吸光值A。分別記為A對照管和A測定管，△A=A測定管-A對照管 | ||||
酶活性計算公式
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y=0.0184x+0.0002，R2=0.999
（1）按照蛋白濃度計算
酶活性定義：在30℃，pH7.5條件下，每毫克蛋白每分鐘分解二氫槲皮素產(chǎn)生1mmol兒茶素所需的酶量為一個酶活力單位。
DFR活性（mmol/min/mg prot）=（△A-0.0002）÷0.0184×V反總÷（V樣×Cpr）÷T÷2
= 9.06×（△A-0.0002）÷Cpr
（2）按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義：在30℃，pH7.5條件下，每克組織每分鐘分解二氫槲皮素產(chǎn)生1mmol兒茶素所需的酶量為一個酶活力單位。
DFR活性（mmol/min/g 鮮重）= （△A-0.0002）÷0.0184×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T÷2
= 9.06×（△A-0.0002）÷W
V反總：反應總體積，1mL；V樣：反應體系中樣本體積，0.1mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應時間，30min
b．用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y=0.0092x+0.0002，R2=0.999
（1）按照蛋白濃度計算
酶活性定義：在30℃，pH7.5條件下，每毫克蛋白每分鐘分解二氫槲皮素產(chǎn)生1mmol兒茶素所需的酶量為一個酶活力單位。
DFR活性（mmol/min/mg prot）=（△A-0.0002）÷0.0092×V反總÷（V樣×Cpr）÷T÷2
= 9.06×（△A-0.0002）÷Cpr
（2）按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義：在30℃，pH7.5條件下，每克組織每分鐘分解二氫槲皮素產(chǎn)生1mmol兒茶素所需的酶量為一個酶活力單位。
DFR活性（mmol/min/g 鮮重）= （△A-0.0002）÷0.0092×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T÷2
= 9.06×（△A-0.0002）÷W
V反總：反應總體積，1mL；V樣：反應體系中樣本體積，0.1mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應時間，30min
公司正在出售的產(chǎn)品：
C4b ELISA Kit | Ⅹ組磷脂meiA2ELISA試劑盒 |
anti-IgE receptor antibody ELISA Kit | B-細胞淋巴瘤因子3ELISA試劑盒 |
Axotrophin蛋白ELISA試劑盒 | Clavesin1蛋白ELISA試劑盒 |
CD200受體1ELISA試劑盒 | Enah/Vasp樣蛋白ELISA試劑盒 |
大鼠磷脂meiA2(PL-A2)ELISA檢測試劑盒 | 大鼠β羥丁suan(βOHB)ELISA Kit |
順式還原酮加雙氧mei1ELISA試劑盒 | 雞促黃體激su(LH)試劑盒elisa |
人可溶性E選擇su(sE-selectin)檢測試劑盒elisa | CXC趨化因子受體1ELISA試劑盒 |
豬腦鈉su/腦鈉尿肽(BNP)elisa試劑盒 | 腦膜炎奈瑟菌Y群PCR試劑盒 |
海豚鏈球菌(StI)核suan檢測試劑盒 | 同詹姆士城峽谷病毒PCR檢測試劑盒 |
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牛支原體PCR檢測試劑盒 | 禾谷鐮刀菌PCR試劑盒 |
辛諾柏病毒PCR檢測試劑盒 | GABA 大鼠γ氨基丁suanELISA檢測試劑盒 |
bFGF 雞堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒 | 海藻巴斯德菌=海藻百伯史坦菌PCR檢測試劑盒 |
BDNF 大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子ELISA檢測試劑盒 | 同牛皰疹病毒型牛巨細胞病毒PCR檢測試劑盒 |
合(NOS)ELISA試劑盒 | BAX 人Bcl-2相關X蛋白ELISA檢測試劑盒 |
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