商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
SUMO 蛋白酶 | 1000U | A-PJ1110 |
產(chǎn)品介紹:
SUMO 蛋白酶,也稱(chēng)為 UIP 蛋白酶(分子量 26kD),是一種具有較高活性的半胱氨蛋白酶。SUMO 蛋白酶以一種非常特異的方式切割蛋白,它特異性識(shí)別 UBL 蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)-SUMO,而不是氨基酸序列,故該蛋白酶可以切割重組融合蛋白的 SUMO。切割的最佳溫度為 30°C,該酶作用溫度和 PH 范圍(pH7-9)都比較廣泛。酶切后,可通過(guò)Ni-NTA Resin 親和純化很容易地將 SUMO 去除。該 SUMO蛋白酶是自 E.coli 表達(dá)經(jīng)親和純化的重組蛋白酶,含有 His標(biāo)簽。
活性定義:在 1XSUMO Protease Buffer (50 mM Tris-HCl,pH 8.0, 0.2% Igepal, 1 mM DTT)中,30°C 反應(yīng) 1h,剪切>85%的 100pmol 底物,所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。
儲(chǔ)存:SUMO 蛋白酶置于-20°C 可保存 2 年。
2. 混勻上述體系后于 30°C 孵育 1-16 小時(shí)。若蛋白為熱不穩(wěn)定性,請(qǐng)?jiān)?4°C 孵育較長(zhǎng)時(shí)間或增加酶用量。
3. 取樣品進(jìn)行 SDS-PAGE 分析。
注意事項(xiàng)
為達(dá)到好的酶切效果,請(qǐng)保證重組蛋白為部分純化的蛋白。對(duì)于大部分融合蛋白,SUMO 蛋白酶所需 NaCl 的濃度不同的蛋白情況會(huì)有所差別,可根據(jù)實(shí)際情況在0~300mM 之間調(diào)節(jié) NaCl 的濃度以達(dá)到最佳的效果。
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