商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Bst 4.0 HNB Bead | 100T(25ul體系) | A-PJ1012 |
產(chǎn)品介紹:
本品為全組分凍干品試劑,包含了標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)緩沖液、HNB 染料、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,使用時(shí)只需要加入引物、模板即可進(jìn)行核酸恒溫?cái)U(kuò)增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴于 RNA 模板的聚合酶活性(逆轉(zhuǎn)錄),還具有依賴于 DNA 的聚合酶活性,因此無(wú)論 DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進(jìn)行高效的恒溫?cái)U(kuò)增。該制品是進(jìn)行 LAMP 及 RT-LAMP 擴(kuò)增反應(yīng)的試劑。優(yōu)化的反應(yīng)體系,確保快速的完成檢測(cè)試劑的反應(yīng)體系建立。在 LAMP 擴(kuò)增起始前 HNB 染料與 Mg2+結(jié)合表現(xiàn)出肉眼可見(jiàn)的紫羅蘭色,當(dāng)陽(yáng)性擴(kuò)增發(fā)生時(shí) Mg2+被 LAMP反應(yīng)的副產(chǎn)物焦磷酸螯合,HNB 染料無(wú)法與 Mg2+結(jié)合表現(xiàn)出肉眼可見(jiàn)的天藍(lán)色。由此判斷天藍(lán)色為陽(yáng)性擴(kuò)增。該顯色方法受樣本緩沖鹽、pH 等影響較小,適用的樣本較pH 顯色法通用性更強(qiáng)。
儲(chǔ)存:-20℃保存 2 年;室溫(25℃)保存>6 個(gè)月。使用凍干微球進(jìn)行全擴(kuò)增體系用品的制備方法:將優(yōu)化的擴(kuò)增引物分裝于 0.2 ml EP 管底部,于 70-80℃條件烘干1-2h。烘干后的 0.2 ml EP 管已經(jīng)含有干燥的擴(kuò)增引物,再加入一粒凍干微球即可制備成全擴(kuò)增體系干燥品,該干燥品無(wú)需冷鏈運(yùn)輸,可長(zhǎng)期保存。
反應(yīng)體系說(shuō)明:每一個(gè)凍干微球?yàn)榘凑?25 μl 反應(yīng)體系建立,在使用時(shí)只需要加入 25 μl 的 ddH2O 或模板即可進(jìn)行反應(yīng)。
使用實(shí)例:
1. 配制反應(yīng)體系
在 0.2 ml EP 反應(yīng)管中加入下述試劑
Bst4.0 HNB Bead 1 粒
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到液體總量 25 μl
10xLAMP Primer Mix
濃度:FIP/BIP 分別為 16 μM、LoopF/B 分別為 8 μM、F3/B3 分別為 2 μM
2. 反應(yīng)體系配好后,置于65°C進(jìn)行反應(yīng)25~45min。肉眼觀察結(jié)果,天藍(lán)色為陽(yáng)性,紫羅蘭色為陰性。
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