NCI-H292人肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)
名稱 | NCI-H292 (人肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)) (STR鑒定正確) |
別稱 | H292; H-292; NCI-HUT-292; Hut292; NCIH292 |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 女性，32歲 |
組織來源 | 肺粘膜上皮細胞癌；肺 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
背景描述 | NCI-H292細胞源自肺支氣管黏液上皮樣癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶；先用成份限定的培養(yǎng)基分離得到，然后換成含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)條件下，NCI-H292細胞保留了黏液上皮的特性，可從其超微結(jié)構(gòu)的表現(xiàn)和多種鱗狀上皮分化標記的表達而判斷。NCI-H292細胞支持HBV的生長，左多巴脫羧酶陰性。NCI-H292細胞可以作為篩選模型，將人類亞基因組片段轉(zhuǎn)染入細胞來研究HBV及其自身基因在病毒性肝炎和肝癌發(fā)生中的作用。NCI-H292細胞角蛋白、波形蛋白、黏液洋紅染色陽線，但神經(jīng)絲三聯(lián)蛋白陰性。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~48小時 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
致瘤性 | Yes, in nude mice; tumors histologically resemble the original biopsy specimen and retain mucoepidermoid features. |
基因表達情況 | keratin; vimentin,The cells retain their mucoepidermoid characteristics in culture as determined by their ultrastructure and expression of multiple markers of squamous differentiation.TANK cells show reactivity with human alloantisera specific for the HLA A1, A3, A10, A19, B12, B17, B22 and B40 cross-reactive groups. |
保藏機構(gòu) | ATCC; CRL-1848 |
二、細胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
NGB ELISA Kit | 生孢梭菌（生孢梭狀芽孢桿菌）PCR試劑盒 |
Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit | 癢螨通用PCR試劑盒 |
Adenylate Cyclase 8, Brain(ADCY8)ELISA Kit | 阪崎腸桿菌PCR檢測試劑盒 |
Slit2 ELISA Kit | 馬梭菌PCR檢測試劑盒 |
M30 ELISA Kit | 產(chǎn)suan克雷伯菌PCR試劑盒 |
Aglycin | 乙型流感病毒RT-PCR試劑盒 |
Orexin ELISA Kit | 展開青霉PCR試劑盒 |
VC ELISA Kit | 產(chǎn)毒副溶血弧菌PCR試劑盒 |
AIRA ELISA Kit | 產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌B型PCR試劑盒 |
uridine phosphorylase 1,UPP1 ELISA Kit | 寨卡病毒和基孔肯雅病毒PCR檢測試劑盒 |
PCT ELISA Kit | SP-A 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白AELISA檢測試劑盒 |
UDP Glucuronosyltransferase 1 Family, Polypeptide A1(UGT1A1)ELISA Kit | Ⅺ型膠原α1(COL11α1)ELISA試劑盒 |
Urate Transporter 1(URAT1)ELISA Kit | NCI-H292人肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)脂氧合同工1(LOX-1)ELISA試劑盒 |
Aggrecan(AGC)ELISA Kit | Abl交互子1(ABI1)ELISA試劑盒 |
Adenylate Cyclase 3(ADCY3)ELISA Kit | ACA-IgG 小鼠抗心磷脂抗體IgGELISA檢測試劑盒 |
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