試劑準(zhǔn)備
在臨床實(shí)驗(yàn)室，對試劑準(zhǔn)備一般不太注意，通常的做法是，在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用，而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問題，其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。因此在ELISA測定中試劑的準(zhǔn)備zui為關(guān)鍵的是，在實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20分鐘以上后，再進(jìn)行測定，以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的，主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中，能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度，以滿足測定要求。其次，目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實(shí)驗(yàn)室使用時(shí)對所提供的濃縮液稀釋配制，因此稀釋時(shí)所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。此外，當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時(shí)，則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時(shí)配制。
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小鼠孕激素/孕酮（PROG）ELISA試劑盒免費(fèi)代測 結(jié)果判定
臨床ELISA測定按其表示測定結(jié)果的方式分為定性和定量測定兩大類。定性測定只是對標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出“有”或“無”的結(jié)論，分別用“陽性”和“陰性”來表示?？梢姸ㄐ詼y定通常是用于傳染性病原體的抗原或抗體的測定，以判斷特定病原體感染的存在與否。而定量測定則是對標(biāo)本中待測抗原的多少進(jìn)行量值測定，以具體數(shù)值表示。定量測定基本上是用于非病原體抗原物質(zhì)的測定，如激素、細(xì)胞因子、腫瘤標(biāo)志物、小分子藥物等。目前國內(nèi)在臨床上應(yīng)用的ELISA試劑盒絕大部份是用于傳染性病原體的抗原或抗體的定性測定，也有少部份用于αFP、hCG、細(xì)胞因子等的定量測定。ELISA定性測定的“陽性”和“陽性”的判定依據(jù)是試劑盒所確定的陽性判定值（Cut-off）。定量測定的“量值”依據(jù)是試劑盒中所帶標(biāo)準(zhǔn)品同時(shí)測定得出的劑量反應(yīng)曲線（又稱標(biāo)準(zhǔn)曲線）。有關(guān)ELISA定性和定量測定結(jié)果的數(shù)據(jù)處理后面將有專門章節(jié)討論。本處只想強(qiáng)調(diào)的一點(diǎn)是，ELISA定性測定的“陰性”和“陽性”結(jié)果的判定依據(jù)只能是試劑盒本身所確定的Cut-off值，而不能以衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心供應(yīng)弱陽性定值質(zhì)控血清。為什么要強(qiáng)調(diào)這一點(diǎn)呢？主要是因?yàn)橐郧坝泻芏嗷鶎訉?shí)驗(yàn)室均使用部中心供應(yīng)的弱陽性定值質(zhì)控血清（以前也稱“臨界值”血清）的測定吸光度來判定結(jié)果，高于其判為陽性，反之為陰性，而不管試劑盒Cut-off值為何。到目前為止，仍有一些實(shí)驗(yàn)室在堅(jiān)持這種錯(cuò)誤的做法。試劑盒的Cut-off值的設(shè)立是建立在一系列科學(xué)試驗(yàn)及統(tǒng)計(jì)學(xué)研究的基礎(chǔ)上的（詳見后述），而部中心供應(yīng)的弱陽性定值質(zhì)控血清主要是供臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控時(shí)使用。
下面再解釋一下在ELISA定性測定結(jié)果判定中常用的一些縮寫。
?。?）S/CO：其中S為Sample（樣本）或Specimen（標(biāo)本）的簡寫，表示的是標(biāo)本測定的吸光度值，CO為Cut-off值的簡寫。除競爭抑制法外，其它ELISA定性測定模式中，當(dāng)S/CO值大于或等于1時(shí)，標(biāo)本的測定為陽性，小于1時(shí)為陰性。
（2）S/N或P/N：其中S同（1），N為Negative（陰性對照）的簡寫，P為Patient（患者）的簡寫。較早的試劑盒很多都使用S/N或P/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)仍有一些試劑盒使用這種方式。這種方式與S/CO方式無根本性區(qū)別，只不過是前者將陰性對照（N）的2.1倍視為Cut-off值而已。
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