質(zhì)譜是怎么做到定量分析的？

質(zhì)譜的定量和紫外檢測器，蒸發(fā)光檢測器沒什么本質(zhì)區(qū)別，只不過質(zhì)譜的線性范圍比較令人抓狂而已。當(dāng)然還有一系列的問題，比如說特別是很多生物分析的樣品，你稀釋十倍之后很可能質(zhì)譜信號的強(qiáng)度不會下降十倍。1ppm對應(yīng)的離子計數(shù)為一萬，0.1ppm對應(yīng)的離子計數(shù)不是一千而很可能是五千三千。

質(zhì)譜信號強(qiáng)度與待分析物含量的關(guān)系

任何定量分析方法都需要建立實驗測量信號與待分析物的量的關(guān)系。很幸運的是，在質(zhì)譜中，通常也可以建立這樣的關(guān)系，因此質(zhì)譜信號是可以用于定量的。從題主的說明來看，Ta的疑惑主要在這里。既然問題是“質(zhì)譜是怎樣做到定量的？"，我們不妨把質(zhì)譜信號的產(chǎn)生按時間順序粗略分為三個步驟，即離子的產(chǎn)生，傳輸與檢測。

1. 產(chǎn)生離子時，不同樣品分子的電離通常是相互獨立的。因此樣品量越多，其產(chǎn)生的離子也就越多。目前常用的各種離子化方法（EI、ICP、ESI、MALDI等）在實驗中（嚴(yán)格來說僅在一定濃度范圍內(nèi)——術(shù)語是動態(tài)范圍，dynamic range）都至少滿足樣品量與產(chǎn)生離子量的正相關(guān)，一般情況下也可以進(jìn)一步近似成線性相關(guān)。

2. 傳輸離子時，簡單來說可以認(rèn)為傳輸效率與被傳輸離子的量無關(guān)；（嚴(yán)格地說，被傳輸?shù)碾x子太多時，相同電荷的互相排斥會造成離子束的“體積"變大，導(dǎo)致傳輸效率下降。這種影響在空間有限的離子阱中表現(xiàn)得更加明顯，因此在離子阱質(zhì)譜中一個重要的技術(shù)就是適當(dāng)控制進(jìn)入儀器的離子數(shù)量，使其既不太少也不太多。）

3. 檢測離子時，不論是使用光電倍增管的檢測器，還是檢測鏡像電流的檢測器（ICR/Oribtrap），其信號強(qiáng)度（在一定范圍內(nèi)）均與離子數(shù)量大致線性相關(guān)。

廢話幾句，可能會使題主感覺質(zhì)譜不能定量的原因之一是，我們看到的質(zhì)譜圖常用相對強(qiáng)度作為縱坐標(biāo)，即0-100%強(qiáng)峰，而不展示信號的絕對強(qiáng)度。但在做質(zhì)譜的時候，儀器記錄的當(dāng)然是絕對強(qiáng)度（相對強(qiáng)度也是通過絕對強(qiáng)度換算出來的）。我們需要用絕對強(qiáng)度來定量時，就需要這部分平時不常看的信息了。

另外，在談到色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法時，待分析物與實驗測量信號的關(guān)系之中又多了一層色譜，即待分析物含量->色譜流出物中樣品含量->質(zhì)譜信號。與EI譜圖分析以相對強(qiáng)度為主不同，在色譜-質(zhì)譜聯(lián)用時，信號的絕對強(qiáng)度就成了我們天天都要關(guān)心的內(nèi)容，因為質(zhì)譜信號強(qiáng)度隨時間的變化就是實驗的色譜圖，通常以總離子強(qiáng)度或者某一特定質(zhì)荷比離子的強(qiáng)度作圖。