詳細(xì)介紹
圖1: PSC生物標(biāo)記物表達(dá)。 PSC在CTS Essential 8培養(yǎng)基中培養(yǎng)超過了30代,然后使用Invitrogen PSC 4-Marker 免疫組化試劑盒進(jìn)行染色。采用DAPI復(fù)染(藍(lán)色),PSC展示出了較強(qiáng)的 PSC 標(biāo)記 (A) Oct4 (紅色)以及(B) SSEA4 (綠色)表達(dá)。
分化潛能
在 CTS Essential 8 培養(yǎng)基中培養(yǎng)的 PSC 細(xì)胞已被證實(shí)可產(chǎn)生三種生殖譜系。
圖 2. 定向分化介導(dǎo)的三系分化。PCS在CTS Essential 8培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)并采用下列譜系特異性分化方法進(jìn)行誘導(dǎo)分化: (A) Gibco PSC 定型內(nèi)胚層誘導(dǎo)試劑盒;(B) Gibco PSC心肌細(xì)胞分化試劑盒;(C) Gibco PSC 神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基;和(D) Gibco 多巴胺能神經(jīng)元分化試劑盒。 相應(yīng)的譜系結(jié)果通過以下方法進(jìn)行展示:(A) CXCR4染色,用于定型內(nèi)胚層分化的鑒定;(B) 采用Invitrogen人心肌細(xì)胞免疫組化試劑盒進(jìn)行 TNNT2 及 NKX2.5 染色,用于心肌細(xì)胞分化的鑒定;(C) 采用 Invitrogen 神經(jīng)干細(xì)胞免疫組化試劑盒進(jìn)行Nestin和Sox2染色,用于神經(jīng)干細(xì)胞分化的鑒定;(D) 采用 Invitrogen 多巴胺能神經(jīng)元免疫組化試劑盒進(jìn)行OTX2和FOXA2染色,用于中腦底板分化的鑒定。
從科研用Essential 8 培養(yǎng)基的無縫轉(zhuǎn)化
在 CTS Essential 8 培養(yǎng)基中培養(yǎng)的 PSC 展現(xiàn)出與科研用 Essential 8 培養(yǎng)基相似的效果。
圖 3. PSC 標(biāo)記物表達(dá)的比較。 PSC 在 Essential 8 或 CTS Essential 8 培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 在第三代時(shí),PSC 標(biāo)記染色陽性細(xì)胞與細(xì)胞總數(shù)相比較,獲得標(biāo)記表達(dá)百分比(%)。 無論是科研應(yīng)用 Essential 8 還是 CTS Essential 8 培養(yǎng)基,均出現(xiàn)了較高比例的 PSC 標(biāo)記物表達(dá)。