隨著抗體藥的發(fā)展，
抗體的靶點(diǎn)
由單一靶向轉(zhuǎn)向兩個(gè)或者多個(gè)靶向
相對(duì)應(yīng)的研究和生產(chǎn)工藝流程遇到的挑戰(zhàn)也在升級(jí)
百林科多款重磅產(chǎn)品
在抗體應(yīng)用領(lǐng)域表現(xiàn)亮眼
抗體生產(chǎn)工藝流程圖：
表達(dá)量測(cè)定——ChromaX® A20
細(xì)胞收獲之后，需要對(duì)細(xì)胞液進(jìn)行精準(zhǔn)定量。百林科ChromaX® A20是一款能夠快速、準(zhǔn)確測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的抗體濃度(或滴度)而設(shè)計(jì)的Protein A親和色譜分析柱，是以多孔結(jié)構(gòu)的聚苯乙烯 - 二乙烯基苯(PS-DVB)微球?yàn)樘畛漭d體，重組 Protein A 為配基，通過(guò)特有的表面處理技術(shù)和偶聯(lián)技術(shù)研制而成的。
ChromaX® A20 親和色譜柱特點(diǎn)：
• 親水 PS-DVB 基材，具有剛性好，反壓低，傳質(zhì)快的特性。
• 獨(dú)有的親水處理技術(shù)，使非特異性吸附降至最低，確?？贵w濃度測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性。
• Protein A 特異性結(jié)合 IgG 的 Fc 區(qū)域，高選擇性保證濃度測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確。
• 不銹鋼柱體，可在 HPLC 上直接使用。
• 快速高效，2~5 min 內(nèi)即可完成一次分析。
• 在抗體濃度 0.02~10 mg/mL 的寬范圍內(nèi)具有良好的線性。
• 采用耐堿 Protein A 配基，可以用 0.1 M NaOH 溶液對(duì)色譜柱進(jìn)行再生。
ChromaX®A20良好的線性關(guān)系：
在單抗培養(yǎng)上清液較寬濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，高達(dá)0.9999
抗體分離純化
抗體純化主流工藝步驟主要包括Protein A 的捕獲和兩步精細(xì)純化步驟，百林科提供相應(yīng)解決方案如下：
(一)抗體捕獲—MaXtar® ARPA
蛋白A親和填料MaXtar® ARPA被廣泛用于抗體純化的捕獲步驟。由于蛋白A通過(guò)Fc區(qū)特異性結(jié)合抗體，這一步可以顯著減少過(guò)程相關(guān)雜質(zhì)，包括宿主細(xì)胞蛋白和核酸。其自上市以來(lái)，在單抗、雙抗和Fc融合蛋白均有較好應(yīng)用，具有核心競(jìng)爭(zhēng)力：
• 高耐堿的蛋白A配基，具有完全的自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)。
• 高度交聯(lián)的瓊脂糖基架，且粒徑均一。
• 穩(wěn)定的批間一致性。
• 完善的法規(guī)支持文件RSF。
• 產(chǎn)能大，貨期短，供應(yīng)鏈穩(wěn)定，性價(jià)比高。
MaXtar® ARPA 擁有
高載量、高流速、耐堿的特性：
以Fc融合蛋白為例，在0.5M NaOH累計(jì)浸泡0h、12h、24h、48h后測(cè)試DBC10%動(dòng)態(tài)結(jié)合載量。圖1數(shù)據(jù)可見：0.5M NaOH浸泡48h后，MaXtar® ARPA的動(dòng)態(tài)載量保持80%以上的初始載量水平。
圖1：各階段DBC數(shù)據(jù)
MaXtar® ARPA穩(wěn)定的批間一致性
對(duì)比測(cè)試三個(gè)不同批次的填料A(進(jìn)口品牌)和MaXtar® ARPA，圖2和圖3數(shù)據(jù)可見：3批次MaXtar® ARPA動(dòng)態(tài)結(jié)合載量RSD僅2%，批間差異小于填料A；且MaXtar® ARPA回收率 RSD小于1%，批次間一致性較好。
圖2：填料批次間DBC差異
圖3：填料批次間回收率差異
(二)抗體精純—MaXtar® MMA
MaXtar® MMA是一款多模式填料，常用于抗體純化中的精純階段，可以去除聚集體、蛋白A配基、HCP、DNA 和病毒等多種雜質(zhì)，且具有明顯的性能優(yōu)勢(shì)：
• 改良的 MaXtar® 基架具有更強(qiáng)剛性，因此在較低的反壓下能夠?qū)崿F(xiàn)更高工藝流速，提高工藝效率。
• 高動(dòng)態(tài)載量，一步結(jié)合大部分雜質(zhì)，節(jié)約時(shí)間和成本。
• 耐受廣泛的 pH 和電導(dǎo)率范圍，有助于摸索最優(yōu)工藝條件。
• 多用于挑戰(zhàn)性樣品的純化，尤其對(duì)聚集體去除表現(xiàn)突出。
MaXtar® MMA流穿模式去除聚集體
使用雙抗親和收獲樣品，對(duì)MaXtar® MMA的除聚體能力進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)純度由91.8%提升至99.5%，雙抗的聚集體含量由 6.0% 下降到至 0.5%，聚集體去除效果明顯。
圖5：MaXtar® MMA層析前后SEC-HPLC檢測(cè)圖譜
(左圖為純化層析前純度占比91.8%，聚集體占比6.0%；
右圖為層析后純度占比99.6%，聚集體占比0.5%)
(三)抗體精純—MaXtar® S HC
陽(yáng)離子交換層析介質(zhì)通常用在純化中的精純步驟，以去除HCP等痕量雜質(zhì)。隨著研發(fā)人員對(duì)產(chǎn)品純化的高要求，使用者對(duì)填料提出了高載量和回收率，兼具高選擇性價(jià)比的要求。在這種背景下，百林科通過(guò)不斷努力創(chuàng)新，研發(fā)出具有高載量高分辨率的陽(yáng)離子交換層析介質(zhì)-- MaXtar® S HC。
MaXtar® S HC 擁有高載量特性：
采用CHO細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體(精純后蛋白)作為樣品，對(duì)MaXtar® S HC的DBC(動(dòng)態(tài)結(jié)合載量)進(jìn)行探索，發(fā)現(xiàn)：MaXtar® S HC的DBC是常規(guī)陽(yáng)離子的2倍。
表1. MaXtar® S HC在QB10的動(dòng)態(tài)結(jié)合力
MaXtar® S HC 擁有高回收率的特性：
采用CHO細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體(精純后蛋白)作為樣品進(jìn)行測(cè)試，洗脫回收率可以達(dá)到97%以上。
表2. MaXtar® S HC的純化結(jié)果
百林科多種層析填料
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