百林科多模式層析填料家族中
有這么一類特殊的填料，憑借其獨(dú)特的填料結(jié)構(gòu)
發(fā)揮凝膠過濾和吸附層析的雙重特性
專為超大分子設(shè)計(jì)。
包括MaXtar® COLL 400、MaXtar® COLL 700兩種，分別適用于分子量超過400 KD和700 KD的超大分子。
MaXtar® COLL 400/700產(chǎn)品簡(jiǎn)介
獨(dú)特的雙層結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，外殼是多孔的鈍化層 ，確保 400 KD或700 KD 以上的大分子不會(huì)進(jìn)孔，直接走外水流穿；核心是偶聯(lián)了同時(shí)具有疏水和吸附負(fù)電荷作用基團(tuán)的球形內(nèi)核，最大程度結(jié)合宿主蛋白、 核酸等雜質(zhì)。具有明顯優(yōu)勢(shì)：
• 以流穿模式處理400 KD 或700 KD 以上的大分子，工藝優(yōu)化更容易，更方便線性放大。
• 改良的MaXtar® 基架具有更強(qiáng)剛性，因此在較低的反壓下能夠?qū)崿F(xiàn)更高工藝流速，提高工藝效率。
• 相比于傳統(tǒng)的凝膠過濾層析，擁有更大的上樣量，更高流速，生產(chǎn)效率大大提升。
• 耐受范圍廣，化學(xué)穩(wěn)定性好。
• 適用于病毒及類病毒顆粒等生物大分子分離。
如何選擇MaXtar® COLL 400/700
• MaXtar® COLL 400：如有病毒/大分子在MaXtar® COLL 700上收率不佳，有明顯吸附現(xiàn)象，可嘗試選擇更小孔徑的MaXtar® COLL 400進(jìn)行優(yōu)化。
• MaXtar® COLL 700：主要適用分子量大于700KD(約30nm)的病毒/大分子。
MaXtar® COLL 400/700應(yīng)用案例分享
案例一：MaXtar® COLL 400在VLP的應(yīng)用
圖1：MaXtar® COLL 400純化VLP圖譜
樣品：VLP(單體60kDa，120聚體)
柱體積：30ml
上樣量：300ml
流速：7ml/min
表1：MaXtar® COLL 400純化結(jié)果
小結(jié)：結(jié)合層析圖譜和膠圖可見，純度有明顯提高，雜質(zhì)去除明顯。
案例二：MaXtar® COLL 700在慢病毒中的應(yīng)用
建議測(cè)試的工藝條件
樣品信息：濃縮后樣品
平衡Buffer：20 mM PB，150 mM NaCl ，pH 7.5或1×DPBS，pH 7.5
CIP Buffer：1 M NaOH，30%異丙醇
圖2：MaXtar® COLL 700純化慢病毒圖譜
表2：MaXtar® COLL 700純化結(jié)果
小結(jié)：回收率和雜質(zhì)去除水平，均符合預(yù)期。
MaXtar® COLL 400/700應(yīng)用過程中的Tips
◆ 為最大程度發(fā)揮COLL系列內(nèi)部的多種配基吸雜效果，建議在緩沖液中添加100~150mM NaCl；
◆ 由于雜質(zhì)與內(nèi)部配基之間的高效多模式結(jié)合，需要對(duì)填料進(jìn)行有效清潔，建議使用1M NaOH, 30%異丙醇。
◆ 不推薦使用檸檬酸鹽緩沖液，因?yàn)闄幟仕犭x子會(huì)與配基相互作用。
百林科多種層析填料
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