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mRNA免疫抗體制備服務(wù)

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更新時間：2023-10-17 17:21:35瀏覽次數(shù)：261次

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泰克生物科技（天津）有限公司

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產(chǎn)品簡介

產(chǎn)地	國產(chǎn)	級別	化工級

近年來隨著mRNA合成、化學(xué)修飾mRNA和遞送技術(shù)的發(fā)展，mRNA穩(wěn)定性和翻譯效率大幅提高，免疫原性逐步可控，其在腫瘤領(lǐng)域顯示了巨大的商業(yè)價值。

詳細(xì)介紹

近年來隨著mRNA合成、化學(xué)修飾mRNA和遞送技術(shù)的發(fā)展，mRNA穩(wěn)定性和翻譯效率大幅提高，免疫原性逐步可控，其在腫瘤領(lǐng)域顯示了巨大的商業(yè)價值。mRNA技術(shù)產(chǎn)品是基于mRNA指導(dǎo)蛋白合成的“中心法則"，在體外設(shè)計合成含有編碼特定抗原的mRNA序列，經(jīng)過序列優(yōu)化、化學(xué)修飾和純化等加工，采用不同方式遞送至人體細(xì)胞，利用機體細(xì)胞翻譯產(chǎn)生蛋白、誘導(dǎo)免疫應(yīng)答、補充機體蛋白、調(diào)節(jié)免疫等作用，從而預(yù)防或治療疾病。人類90%以上的疾病與蛋白質(zhì)相關(guān)，基于mRNA特性，mRNA技術(shù)在預(yù)防與治療疾病方面前景廣闊。

圖片2.jpg

Fig1 mRNA 免疫

泰克生物能夠為客戶提供多種抗原（包括但不限于PTM蛋白、細(xì)胞內(nèi)蛋白、分泌蛋白）的mRNA免疫抗體制備服務(wù)，此外，泰克生物擁有包括從基因合成與修飾、AAV載體構(gòu)建、動物免疫、雜交瘤細(xì)胞的融合與篩選、抗體生產(chǎn)等一站式技術(shù)服務(wù)，并且有配套的抗原抗體結(jié)合分析、抗原抗體BLI親和力測定、抗體細(xì)胞系驗證、等許多下游配套服務(wù)，為客戶的抗體藥研發(fā)與生產(chǎn)提供有力的支撐。

█ mRNA的免疫原性

純化的mRNA僅包含單鏈RNA （single-stranded RNA, ssRNA）分子，通過遞送系統(tǒng)包裹并以內(nèi)吞方式進(jìn)入核內(nèi)體，進(jìn)入核內(nèi)體后mRNA從遞送系統(tǒng)中釋放出來并被定位在膜上的Toll樣受體（Toll-like receptor, TLR)）7和TLR-8識別，導(dǎo)致下游的髓樣分化標(biāo)記物88 （myeloid differentiation marker 88, MyD88）被激活，引起I型干擾素（interferon, IFN）激活和炎癥因子的分泌。

█ mRNA疫苗制備過程

1. 制備IVT mRNA：抗原選擇、線性DNA模板合成、體外轉(zhuǎn)錄和mRNA純化。在對病原體的基因組進(jìn)行測序后選擇目標(biāo)抗原時，將其插入質(zhì)粒 DNA 模板中。生產(chǎn) DNA 模板應(yīng)包含抗原序列、5′和3′ UTR以及5′UTR上游的T7啟動子。體外轉(zhuǎn)錄過程需要 DNA 模板、修飾或未修飾的核苷和 T7 RNA 聚合酶。

2. mRNA進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)需要借助載體，mRNA疫苗的遞送載體包括病毒載體和非病毒載體兩種：病毒載體以慢病毒、腺病毒相關(guān)病毒和仙臺病毒等為主，病毒載體在進(jìn)行核酸遞送的同時也可能會引起免疫反應(yīng)，從而影響疫苗的效果，非病毒載體主要包括脂質(zhì)體、樹突狀細(xì)胞(dendritic cell, DC)、無機納米粒子、陽離子細(xì)胞穿膜肽等。

█ mRNA遞送系統(tǒng)

1.裸mRNA直接注射法：直接注射至組織中，通常使用蔗糖、海藻糖溶液等緩沖液對mRNA進(jìn)行一定的稀釋處理。優(yōu)點是成本低、方便快捷、缺點是mRNA極易被RNA酶降解，且難以穿過細(xì)胞膜。

2.體外DC負(fù)載：將mRNA離體加載或電穿孔入樹突狀細(xì)胞（Dendritic cells，DCs），體外負(fù)載樹突狀細(xì)胞有利于抗原呈遞細(xì)胞的有效靶向。

3.陽離子納米乳：一種基于水包油的遞送方式，由角鯊烯和表面活性劑如吐溫、生育酚等組成，MF59和AS03是2種水包油乳劑佐劑，應(yīng)用于2009年的流感疫苗研究中。

█ mRNA藥物優(yōu)勢

（1）易在體外生產(chǎn)和純化，除去蛋白藥物及病毒載體制備的復(fù)雜過程，同時可避免宿主蛋白及病毒源性污染；

（2）IVT mRNA的生產(chǎn)工藝通用性強,可以快速應(yīng)用于生產(chǎn)不同的目的蛋白,節(jié)省藥物研發(fā)時間,提高效率；

（3）mRNA僅需進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)即可翻譯成蛋白質(zhì)，無需進(jìn)入細(xì)胞核，因此不存在基因的插入和整合，提高藥物的安全性；

（4）通過調(diào)節(jié)序列修飾和遞送載體可以改變其半衰期；

█ mRNA免疫服務(wù)流程

服務(wù)項目	內(nèi)容	周期
mRNA合成	mRNA合成、修飾與組裝	4-6周
動物免疫	皮下多點注射，標(biāo)準(zhǔn)免疫流程，ELISA測血清效價	10周
融合與篩選	脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，ELISA篩選陽性克隆，擴增	4-6周
抗體生產(chǎn)	雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)，抗體純化	可選