詳細(xì)介紹
目前PCR應(yīng)用已得到長足的發(fā)展,已成為疫病診斷,疫情控制等方面的有力工具,為了避免在PCR方法中出現(xiàn)污染及出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果等現(xiàn)象,保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境安全控制上嚴(yán)格做到實(shí)驗(yàn)室獨(dú)立區(qū)域設(shè)計(jì),功能分區(qū)明確,保證實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境,人流物流嚴(yán)格分流,設(shè)計(jì)合理的壓力梯度,形成有序的氣流組織方向,切實(shí)做到避免交叉污染。
PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction)的簡稱,是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。
避免污染是PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)首要考慮重點(diǎn)
由于PCR技術(shù)的高度敏感性,PCR技術(shù)要求高、影響因素多,從樣品制備到結(jié)果的產(chǎn)生,任何一處細(xì)微的失誤均會造成結(jié)果的偏差,導(dǎo)致樣品的假陽性和假陰性結(jié)果。
PCR實(shí)驗(yàn)室研究過程中,很多操作都會產(chǎn)生氣溶膠,比如離心、混勻等操作閔。為保證環(huán)境安全,PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)需獨(dú)立區(qū)域設(shè)計(jì),避免與其余環(huán)境的交叉混雜。
一、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范
《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》國家標(biāo)準(zhǔn)GB19489-2008
《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范》衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]8號文
《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法》衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]10號文
《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)》衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]10號文附件
《基因檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求》國家質(zhì)監(jiān)檢驗(yàn)總局SN/T1193-2003
《潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境-生物污染控制》國際標(biāo)準(zhǔn)ISO14698
《潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》國家標(biāo)準(zhǔn)GB500732013
《潔凈室施工及驗(yàn)收規(guī)范》GB50591-2010
《室內(nèi)空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T
《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》國家標(biāo)準(zhǔn)GB50346-2011《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》衛(wèi)生部(2004-11-12)
二、PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域劃分
1、功能劃分
試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)、純化區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)、后純化區(qū)。
2、設(shè)計(jì)原則
按的要求,各實(shí)驗(yàn)區(qū)域必須是相互獨(dú)立的,不能直通,每個獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)有專門的閘間供工作人員換工作服和鞋,進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向順序,即只能從左邊試劑準(zhǔn)備區(qū),標(biāo)本制備區(qū),擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū),純化區(qū),擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)到后純化區(qū),避免發(fā)生交叉污染。
3、為避免樣本間的交叉污染,房間采取凈化控制,總體設(shè)計(jì)為10萬級。閘間(緩沖間)設(shè)計(jì)為正壓區(qū),保證與外界環(huán)境隔離,避免從鄰近區(qū)域進(jìn)入本區(qū)域的氣溶膠污染。
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