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645A-白膜層分離及核酸提取自動(dòng)化方案-(貝克曼)

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更新時(shí)間:2023-12-20 11:59:31瀏覽次數(shù):257

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生物技術(shù)的飛速發(fā)展,也讓生物資源的利用更加精準(zhǔn)和充分。人的血液是個(gè)巨大的寶庫(kù),可以輔助疾病診斷與治療。隨著精準(zhǔn)醫(yī)療的提出,個(gè)體化診斷、CART治療、單克隆抗體治療等技術(shù)不斷成熟普及,血液的利用也越來(lái)越廣泛,尤其是特定成分的使用。血液經(jīng)離心分離,從上到下,可以獲得血漿、白膜層和紅細(xì)胞等。其中,白膜層的分離

詳細(xì)介紹

生物技術(shù)的飛速發(fā)展,也讓生物資源的利用更加精準(zhǔn)和充分。人的血液是個(gè)巨大的寶庫(kù),可以輔助疾病診斷與治療。隨著精準(zhǔn)醫(yī)療的提出,個(gè)體化診斷、CART治療、單克隆抗體治療等技術(shù)不斷成熟普及,血液的利用也越來(lái)越廣泛,尤其是特定成分的使用。血液經(jīng)離心分離,從上到下,可以獲得血漿、白膜層和紅細(xì)胞等。其中,白膜層的分離需要專業(yè)的技術(shù)和熟練的技巧,手工操作緩慢而繁瑣。

Beckman Biomek i5自動(dòng)化工作站可以精準(zhǔn)定位、快速分離白膜層,使流程標(biāo)準(zhǔn)化,消除不同技術(shù)人員的操作差異,提高白膜層核酸提取的產(chǎn)量和質(zhì)量,并實(shí)現(xiàn)高通量樣品處理。

*掃描條形碼記錄樣本信息

*拍照模塊對(duì)進(jìn)行拍照

*液面分析系統(tǒng)對(duì)紅細(xì)胞層、血漿層和白膜層進(jìn)行高度分析

*分析結(jié)果上傳到Biomek軟件

*Biomek軟件根據(jù)分析系統(tǒng)結(jié)果進(jìn)行液面高度確認(rèn)

*Biomek軟件根據(jù)白膜層高度,驅(qū)動(dòng)加樣器進(jìn)行白膜層分離

Biomek i5自動(dòng)化工作站。該款工作站配置了靈活8通道加樣器、1個(gè)斜側(cè)抓板機(jī)械手、渦旋振蕩模塊、吸頭回放模塊以及拍照模塊。拍照和架模塊可根據(jù)需要進(jìn)行拆卸,拆卸后可增加9個(gè)通用板位。分離96個(gè)樣本的白膜層需要約20min。

白膜層主要包括富含血小板區(qū)、富含淋巴細(xì)胞區(qū)、富含單核細(xì)胞區(qū)和富含粒細(xì)胞區(qū),粘度較大,使用1000ul寬口吸頭可以更好地吸取白膜層。

內(nèi)置轉(zhuǎn)圈吸液模板,限度模擬手工吸取白膜層操作,提高分離效率。


磁珠法白膜層核酸提取流程



白膜層核酸提取臺(tái)面布局舉例。96個(gè)樣本的白膜層核酸提取所需耗材:

(1)2盒100Ou吸頭,分別用于吸取試劑、白膜層和廢液。

(2)1盒20Oul吸頭,用于轉(zhuǎn)移洗脫后核酸。

(3)4個(gè)試劑槽,用于放置各種裂解液、洗滌液和洗脫液

(4)2個(gè)深孔板,分別作為提取板和廢液板。

(5)1個(gè)PCR板,用于存放提取后的核酸。

(6)1個(gè)磁力架,用于吸附磁珠。


Biomeki5 自動(dòng)化工作站使用的耗材和試劑品牌開(kāi)放,用戶可根據(jù)需要選擇國(guó)產(chǎn)或進(jìn)口品牌的耗材和試劑,成本掌握在用戶手中。

靈活8通道移液器,每個(gè)通道均可獨(dú)立控制,間距可根據(jù)不同孔間距的耗材自動(dòng)調(diào)整,可同時(shí)吸取不同體積的液體。

斜側(cè)抓板機(jī)械手,實(shí)現(xiàn)工作站內(nèi)及周邊耗材的搬運(yùn),斜側(cè)夾板屬性保證耗材搬運(yùn)無(wú)局限性,充分利用臺(tái)面空間。

渦旋振蕩模塊,振速0-180ORPM。模塊上帶有自動(dòng)夾板器及感應(yīng)裝置,樣品板在被夾板器固定后才進(jìn)行高速振蕩,過(guò)程安全可靠。

拍照模塊,具備兩個(gè)高清拍照鏡頭,可以對(duì)不同高度的紅細(xì)胞層、白膜層、血漿層進(jìn)行識(shí)別及定位,LED燈用于拍照過(guò)程的光補(bǔ)償。

獨(dú)立孔結(jié)構(gòu)吸頭盒,每個(gè)吸頭都有獨(dú)立的存放空間,可自動(dòng)將用過(guò)的吸頭回放至原吸頭盒的原孔中,不會(huì)發(fā)生氣溶膠交叉污染,在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)允許的情況可重復(fù)使用,節(jié)約成本。

Table.1 白膜層核酸提取結(jié)果。起始樣本為8個(gè)白膜層樣本各200u利用 GenFind V2 盒通過(guò)磁珠法進(jìn)行核酸提取,用Nanodrop檢測(cè)核酸濃度和純度。從上表測(cè)得的結(jié)果可以看出,Biomek工作站提取核酸的濃度、純度良好。

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