1、試劑配制及保存
緩沖劑 6包 每包加510mL蒸餾水或純凈水溶解,常溫存放。
顯色劑 3瓶 每瓶加10.5mL緩沖液溶解,4℃冰箱保存,每份加100μL。
底 物 10瓶 每瓶加3.1mL蒸餾水或純凈水溶解,4℃冰箱保存,每份加100μL。
酯酶 10瓶 不用配制,直接取用 4℃冰箱保存,每份加100μL。
酶活力 空白對(duì)照1分鐘吸光度變化值(ΔΑ0)在0.15-0.3之間。
2、樣品提取
取2g果蔬樣品(塊莖類(lèi)取4g)剪成1cm左右見(jiàn)方碎片,放入小燒杯(或取樣瓶)中;加入10mL緩沖液,振蕩1~2min,倒出提取液,靜置2min待測(cè)。
3、測(cè)試
對(duì)照測(cè)試:于專(zhuān)用反應(yīng)瓶中加入2.5mL緩沖液,再分別加入100μL顯色劑和酶液,混勻,37℃下放置15min后加入100μL底物,搖勻并立即倒入比色杯中,放入測(cè)試通道,按儀器“對(duì)照"鍵測(cè)試3min的吸光度變值ΔΑ0。
樣品測(cè)試:于專(zhuān)用反應(yīng)瓶中加入2.5mL待測(cè)樣品液,再分別加入100μL顯色劑和酶液,混勻,37℃下放置15min后加入100μL底物,搖勻并立即倒入比色杯中,放入測(cè)試通道,按儀器“樣品"鍵,測(cè)試3min的吸光度變化值ΔΑt。
結(jié)果判定:
◇ 以分光光度計(jì)測(cè)試時(shí),按以下表達(dá)式計(jì)算出抑制率: 抑制率(%)=[(ΔΑ0-ΔΑt)/ΔΑ0]×100
◇ 以農(nóng)殘檢測(cè)儀檢測(cè)時(shí)其抑制率一般可自動(dòng)計(jì)算。若樣品抑制率≥50%,表示被測(cè)果蔬農(nóng)殘超標(biāo),為陽(yáng)性結(jié)果。陽(yáng)性結(jié)果的樣品需做2次以上重復(fù)檢測(cè),多次檢測(cè)仍呈陽(yáng)性需用氣相色譜等儀器做進(jìn)一步確認(rèn)。
操作提示:
在加底物的環(huán)節(jié)中,可預(yù)先將底物加入比色杯,待靜置時(shí)間一到,馬上將反應(yīng)瓶中的反應(yīng)液倒入已經(jīng)加有底物的比色杯,并迅速放入測(cè)試通道進(jìn)行測(cè)試。這樣可以減少同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品時(shí)因加底物時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而造成的誤差。
4、注意事項(xiàng)
酶活性要求:本試劑盒中酶試劑正?;钚驭う?≥0.3,符合GB/T 5009.199-2003方法的要求。
保存:試劑盒應(yīng)保存4℃冰箱,保質(zhì)期12個(gè)月。
使用:任何試劑使用時(shí),用一瓶打開(kāi)一瓶,用完后才使用新的,防止變質(zhì)。
器具專(zhuān)用原則:任何用于移液的器具和容器都應(yīng)各自貼上標(biāo)簽,單獨(dú)使用,以免交叉污染。
試劑只出不入原則:測(cè)試時(shí),從任何試劑瓶吸出的試劑,禁止再次注射回試劑瓶。
環(huán)境溫度對(duì)測(cè)試的影響:當(dāng)環(huán)境溫度過(guò)低時(shí)(一般低于20℃),測(cè)試時(shí)需作必要保溫措施。
常溫方法:本試劑可用常溫方法測(cè)試,測(cè)試時(shí)試劑室溫放置10min,測(cè)試1min的吸光度變化值ΔΑ0。正常活性ΔΑ0在0.15~0.3之間。
我司已啟用新的產(chǎn)品包裝標(biāo)識(shí),產(chǎn)品新舊包裝更替過(guò)程中,隨機(jī)發(fā)貨,以實(shí)際收到為準(zhǔn)!