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北京測(cè)維光電儀器廠
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閱讀:0發(fā)布時(shí)間:2024-10-6
焦深
焦深也稱為焦點(diǎn)的深度,當(dāng)焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)樣本的某一點(diǎn)時(shí),不僅看清楚的是這一點(diǎn),而且它的上下兩側(cè)也能同時(shí)看清楚,看到的物體不僅僅是一個(gè)平面,而且還看到有一定的厚度,這個(gè)清晰的厚度部分即是焦深。焦深的計(jì)算公式為:
D=k*η/(M*NA) ①
式中:k為常數(shù),約為240um;η為被檢物體與物鏡間介質(zhì)的折射率;M為總放大率;NA為物鏡的數(shù)值孔徑,
由式①可知,總放大率愈高,數(shù)值孔徑值愈大,焦深愈淺。焦深與顯微照相關(guān)系密切,例如,一個(gè)用加拿大樹(shù)膠(折射率1.5)封埋的6um厚的標(biāo)本,當(dāng)用40×,NA為0.65物鏡和16×目鏡觀察時(shí),按式①計(jì)算,其焦深為2.8 um,要看清這個(gè)標(biāo)本的全厚度景像需要進(jìn)行兩次調(diào)焦;而當(dāng)用100×,NA為1.25物鏡和10×目鏡觀察時(shí),其焦深為0.29 um,要看清這個(gè)標(biāo)本的全厚度需要進(jìn)行20次調(diào)焦。因此在顯微攝影中,為了加大景深,照顧到多一點(diǎn)的內(nèi)容,有時(shí)就用NA值低、放大率小的物鏡和采用折射率較高的封藏劑。
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