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上海柏欣儀器設備廠
主營產(chǎn)品： 干燥箱;培養(yǎng)箱;恒溫恒濕箱;人工氣候箱;光照培養(yǎng)箱; |
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上海柏欣儀器設備廠
主營產(chǎn)品： 干燥箱;培養(yǎng)箱;恒溫恒濕箱;人工氣候箱;光照培養(yǎng)箱; |
2012-5-22 閱讀(1109)
應用zui廣的核酸濃縮法是酒精沉淀法。在中常液體濃度單價陽離子存在下，參加一定量的酒精后，所形成有核酸沉淀可經(jīng)離心而回收，甚至于對低至pg量的DNA 或RNA，也可定量回收?；厥盏暮怂峥砂此枰后w濃度，再溶于合適的緩和沖突液中。
具徒手體操作時，可向含樣品的小離心管中參加V/10單價陽離子鹽儲存液2V無薄酒精，混勻，放冰水浴中15－30min，抽取目測均衡，0－4度，12000g，離心10min。吸棄上清，再另70酒精0.5－1ml，12000g，0－4度蕩滌離心2min。吸棄上清，沉淀用油泵抽干或敞開蓋子晾干后，溶于合適大小的緩和沖突液中。
單價陽離子鹽的挑選，主要基于下述思索問題：用CH3COOH銨可減損dNTP的共沉淀，但在往后要作核酸的磷酸化時應防止用CH3COOH銨，因銨離子是T，多核苷酸激酶的猛烈制約劑。當用較高液體濃度的酒精沉淀RNA時，常用LiCl，因LiCl在酒精中溶解度頎長，不隨核酸共沉淀。包括SDS的核酸樣品，應運用NaCl，這時該去垢劑要70酒精中仍維持可溶。DNA 和RNA沉淀，大部分運用CH3COOH鈉（pH5.2 ）。
