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Certest星狀病毒衣殼重組蛋白 Certest生物原料

Astrovirus capsid recombinant protein

西班牙Certest公司

Certest生物原料星狀病毒(Astrovirus, AstV)是一類可感染人及其他多種動(dòng)物的腸道疾病相關(guān)病原。目前該病毒已經(jīng)從人、豬、牛、蝙蝠、犬、貓等31種哺乳類動(dòng)物和雞、火雞、鴨等6種禽類中檢測出來,然而星狀病毒感染與動(dòng)物腸道疾病之間的關(guān)系并沒有得到深入的了解。基因變異性已在許多種動(dòng)物星狀病毒中發(fā)現(xiàn),但是由此產(chǎn)生的抗原性差異僅在人星狀病毒中得到證實(shí)。此外,越來越多的研究證據(jù)表明星狀病毒之間可以發(fā)生基因重組。由此可知,星狀病毒的多宿主性、基因差異性及其重組現(xiàn)象和跨種間傳播及適應(yīng)新宿主的能力,使得星狀病毒成為潛在的新興人畜共患病原。Certest生物原料

Astrocytes can cause chronic antigens to produce diarrhea symptoms, including mammalian and avian genus. Mammals are classified into human astrovirus, cat astrovirus, porcine star virus, sheep star virus and mink astrovirus according to the host. Avian astrovirus includes turkey star virus, avian nephritis virus.

Certest生物原料探究豬星狀病毒的分離培養(yǎng)特性和分析其遺傳變異規(guī)律和衣殼蛋白的抗原特性,從而為進(jìn)一步加深對豬星狀病毒的了解而提供一定的理論支持和實(shí)踐依據(jù)。 本研究采用RT-PCR檢測為豬星狀病毒陽性的豬糞便上清進(jìn)行病毒分離；在添加胰酶的條件下,分離得到1株能在PK-15細(xì)胞上穩(wěn)定增殖20代同時(shí)產(chǎn)生明顯細(xì)胞病變(CPE)的豬星狀病毒(PAstV-GX1)毒株,病毒的TCID50為10622/ml。然而在不添加胰酶條件下,病毒的致細(xì)胞病變能力顯著降低。通過采用常規(guī)PCR,3'RACE及5'RACE等方法,基本獲得分離毒株的全基因組序列,序列長6342bp,包括大部分ORFla,完整的ORFlb及ORF2,3'非編碼區(qū)和poly(A)尾。全基因組核苷酸序列同源性分析表面,分離株P(guān)AstV-GX1與目前一株MAstV3型星狀病毒全序列(PAstV-Shanghai)的同源性zui高(83.2%),而與其他基因型豬星狀病毒的同源性不到50%。由全長衣殼蛋白基因ORF2構(gòu)建的遺傳進(jìn)化分析表明,PAstV-GX1與PAstV-Shanghai及其他MAstV3型星狀病毒處于同一分支,與加拿大分離株P(guān)AstV-12-3的親緣性zui近,且相比于其他豬星狀病毒毒株,PAstV-GX1與經(jīng)典型人星狀病毒的親緣性zui近。此外,核苷酸序列分析發(fā)現(xiàn),PAstV-GX1基因組存在星狀病毒保守的3個(gè)特殊的核苷酸序列,即核糖體移位序列,亞基因組轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子序列及基因組3’端的莖環(huán)結(jié)構(gòu)序列。 在由基因組推導(dǎo)的非結(jié)構(gòu)蛋白和結(jié)構(gòu)蛋白氨基酸序列分析發(fā)現(xiàn),ORF1a的5’端存在5個(gè)跨膜螺旋結(jié)構(gòu)；在nsp1a的aa50及aa500附近存在2個(gè)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)。衣殼蛋白序列分析發(fā)現(xiàn),豬星狀病毒ORF2推導(dǎo)編碼的氨基酸序列存在保守區(qū)和變異區(qū),分別為aal～aa419和aa420～aa750,并且衣殼蛋白的5’和3’端存在2個(gè)抗原指數(shù)較高的區(qū)域。本研究成功實(shí)現(xiàn)了PAstV-GX1衣殼蛋白基因ORF2高度變異區(qū)的原核蛋白表達(dá)。通過Western-blot方法分析發(fā)現(xiàn),本實(shí)驗(yàn)獲得的重組蛋白具有良好的反應(yīng)原性,為進(jìn)一步的免疫原性的鑒定及血清學(xué)病原診斷試劑盒的開發(fā)提供了重要的基礎(chǔ)。

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Certest Biotec，S.L. 是一家獨(dú)立的生物技術(shù)公司，致力于人類臨床領(lǐng)域的IVD診斷產(chǎn)品的開發(fā)和制造?？焖贆z測是基于快速、準(zhǔn)確和易于操作的診斷產(chǎn)品。 此外，Cerstest還有多種實(shí)時(shí)PCR產(chǎn)品，可以用于醫(yī)院臨床、實(shí)驗(yàn)室科研等。

Certest公司于2002年在薩拉戈薩成立，是一家創(chuàng)新技術(shù)型公司。公司的發(fā)展是基于新產(chǎn)品的開發(fā)、市場空間和機(jī)遇的探索，十幾年來一直以高度專業(yè)化，以客戶為導(dǎo)向，不斷得創(chuàng)新，優(yōu)化產(chǎn)品，專業(yè)知識，取得廣大客戶的信任和支持。Certest的質(zhì)量體系已通過ISO 13485認(rèn)證。

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