百日咳IgG抗體定量檢測(cè)試劑盒（酶免法） 返回列表頁(yè)

百日咳IgG抗體定量檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
1. 名稱(chēng)
通用名：百日咳 IgG試劑盒 (定量)     
英文名：Bordetella Pertussis IgG (quant.)
商品名：賽潤(rùn)ELISA classic 百日咳 IgG抗體定量檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
漢語(yǔ)拼音：Serion ELISA classic Bairike IgG kangti dingliang jiance shijihe (meilian mianyifa)   
2．用途
用于定量測(cè)定人血清、腦脊液或血漿中的抗百日咳桿菌抗體。
3. 診斷意義  
賽潤(rùn)ELISA classic 百日咳 IgG抗體定量檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）用于定量檢測(cè)人血清和血漿中抗百日咳桿菌的抗體。該試劑可用于百日咳急性感染或近期感染的診斷及流行病學(xué)研究，IgG-ELISA試劑則用于監(jiān)控疫苗的接種情況。 
 
對(duì)于IgM抗體的檢測(cè)，百日咳細(xì)胞表面的脂多糖具有明顯的診斷學(xué)特征，而PT和FHA在這里并不適用6，因此利用賽潤(rùn)ELISA classic百日咳IgM試劑進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，應(yīng)使用百日咳的全細(xì)胞來(lái)制備抗原。  
 
百日咳血清學(xué)檢測(cè)還不能代替作為最終診斷依據(jù)的病原體分離，它是對(duì)病原體分離檢測(cè)的一個(gè)補(bǔ)充。 
 
其他細(xì)菌例如副百日咳、流感（嗜血）桿菌、粘膜炎莫拉菌、肺炎支原體、沙眼衣原體或某些病毒如呼吸道合胞體病毒和腺病毒等也能引起類(lèi)似百日咳的病癥。 
4. 說(shuō)明
本說(shuō)明書(shū)除百日咳IgG抗體定量檢測(cè)的內(nèi)容外，還涉及到IgM/IgA抗體的定量檢測(cè)，以及對(duì)結(jié)果的分析等。
 
5. 賽潤(rùn)ELISA classic - 檢驗(yàn)原理 
 
用抗原包被微量板孔，制成固相載體。加患者血清到板孔中，其所含的抗體特異性地與固相載體中現(xiàn)存抗原結(jié)合，形成免疫復(fù)合物。除去多余物質(zhì)后，加入結(jié)合了堿性磷酸酶的IgG、IgA或IgM抗體，使之與上述免疫復(fù)合物反應(yīng)。洗板，除去多余的結(jié)合物，加入底物（對(duì)硝基苯磷酸鹽）。其與酶結(jié)合的免疫復(fù)合物反應(yīng)，產(chǎn)生有顏色產(chǎn)物，顏色強(qiáng)度與特異性抗體含量成正比。 
 
 6. 試劑盒的組成 
 
試劑盒組成    IgG試劑盒  IgM試劑盒 IgA試劑盒  
數(shù)量 / 容積 
微孔條（此微孔條可拆下單獨(dú)使用，每條有8孔，共96孔，已經(jīng)包被了抗原） 
1個(gè)微孔條框架 
包被材料未被激活     12           12          12 
標(biāo)準(zhǔn)血清（立即可用） 
人血清溶于含蛋白的磷酸鹽緩沖液；抗HIV抗體、抗乙肝病毒（HBV）表面抗原和抗丙肝病毒（HCV）抗體均為陰性； 
防腐劑：< 0.1% 疊氮化吶  
染色劑：紫紅色O     2×2毫升    2×2毫升   2×2毫升
陰性對(duì)照血清（立即可用） 
人血清溶于含蛋白的磷酸鹽緩沖液；抗HIV抗體、抗乙肝病毒（HBV）表面抗原和抗丙肝病毒（HCV）抗體均為陰性； 
防腐劑：< 0.1% 疊氮化吶  
染色劑：里沙明綠 V     1×2毫升    1×2毫升   1×2毫升
酶標(biāo)記的抗人IgG, IgA, IgM （立即可用） 
羊抗人IgG, IgA, IgM（多克?。?，標(biāo)記堿性磷酸酶后在蛋白穩(wěn)定劑中儲(chǔ)存 
防腐劑: 0.01% 甲基異噻唑啉酮 
 0.01% 溴化硝基二堊烷     13毫升      13毫升      13毫升 
濃縮洗液（可稀釋至1000毫升） 
氯化鈉溶液，含吐溫20和30mM Tris  
防腐劑： < 0.1%疊氮化吶     1×33.3毫升1×33.3毫升 1×33.3毫升 
稀釋緩沖液 
磷酸鹽緩沖液，內(nèi)含蛋白和吐溫20 
防腐劑： < 0.1%疊氮化吶 
0.01克 /升的溴酚藍(lán)鈉鹽     2×50毫升    2×50毫升  2×50毫升
終止液 
1.2N 氫氧化鈉     15毫升      15毫升      15毫升 
底物（立即可用） 
對(duì)硝基苯磷酸鹽，不含其它溶劑的緩沖液 
防腐劑：< 0.1% 疊氮化吶 
（未開(kāi)封瓶子中的底物可能會(huì)輕微變黃，但不會(huì)影響其質(zhì)量）     13毫升      13毫升      13毫升 
帶有標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和評(píng)估表的質(zhì)量控制文件 
（抗體以IU/毫升或U/毫升計(jì)量）     1             1           1 
7. 其它檢測(cè)所需物質(zhì) 
 
-  普通實(shí)驗(yàn)室所需的儀器裝置 
-  IgM檢測(cè): 另需賽潤(rùn)含對(duì)照抗原的賽潤(rùn)類(lèi)風(fēng)濕因子Rf -吸附劑（產(chǎn)品編號(hào)Z100/5ml和Z200/20ml）  
-  分光光度計(jì)，波長(zhǎng)405納米，建議參考波長(zhǎng)范圍620納米- 690納米（例如 650納米） 
-  37℃溫箱 
-  濕盒 
-  蒸餾水。 
 
8. 儲(chǔ)存及穩(wěn)定性 
有效期內(nèi)
9. 賽潤(rùn) ELISA classic的檢驗(yàn)步驟 
9.1 注意事項(xiàng) 
 
只有全部使用賽潤(rùn) ELISA classic試劑才能保證檢測(cè)效果，因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。尤其是標(biāo)準(zhǔn)血清，對(duì)照血清以及酶標(biāo)記物，必須使用試劑盒配備的，不要使用其它批號(hào)產(chǎn)品。稀釋緩沖液，洗液，終止液和底物溶液可用于所有賽潤(rùn) ELISA classic試劑盒。 
 
ELISA classic試劑盒內(nèi)所有試劑均必須正確地存放。應(yīng)在未開(kāi)封的情況下，保存于2-8℃，并在有效期（見(jiàn)標(biāo)簽說(shuō)明）內(nèi)使用。詳細(xì)的穩(wěn)定性和儲(chǔ)存資料在“8. 儲(chǔ)存及穩(wěn)定性"內(nèi)將加以詳述。 
 
每一種試劑都是經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)以保證優(yōu)的檢測(cè)結(jié)果。這些試劑如果未經(jīng)規(guī)定被稀釋或改動(dòng)都會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)的敏感性的降低。 
 
在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。 
 
請(qǐng)從標(biāo)記處剪開(kāi)密封袋。如果鋁袋破損或者開(kāi)啟裝有干燥劑的鋁袋后而未以?shī)A子封緊的，則不要繼續(xù)使用微孔條。 
 
開(kāi)始試驗(yàn)前，將所有試劑置于室溫。 
 
從試劑管中吸取試劑的時(shí)候，應(yīng)注意使用無(wú)菌技術(shù)以防污染。為避免假陽(yáng)性結(jié)果，吸加酶結(jié)合物時(shí)，吸嘴應(yīng)確保不接觸或噴灑于小孔的外面，注意不要蓋錯(cuò)瓶蓋或管蓋。 
 
試驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性依賴(lài)于充分混勻試劑。使用前振蕩裝有對(duì)照血清的小管和所有稀釋過(guò)的溶液（例如使用混合器）。 
 
小心吸取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 對(duì)照血清，酶結(jié)合物或底物時(shí)，第一個(gè)孔與最后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。 
只有嚴(yán)格遵守賽潤(rùn)ELISA classic試劑的試驗(yàn)說(shuō)明才會(huì)得到優(yōu)的檢測(cè)結(jié)果。 
 
如果實(shí)驗(yàn)中未嚴(yán)格遵守控制質(zhì)量控制認(rèn)證文件上的有效性特異準(zhǔn)則，則試驗(yàn)結(jié)果無(wú)效。 
 
洗滌不充分將影響試驗(yàn)結(jié)果： 
 
應(yīng)該小心進(jìn)行洗滌。洗滌步驟應(yīng)遵守相關(guān)洗滌器（平底孔，孔直徑7毫米，深10.9毫米）指導(dǎo)手冊(cè)進(jìn)行。重要的是所有的孔內(nèi)均應(yīng)加入相同體積的洗滌緩沖液。洗滌結(jié)束時(shí)，應(yīng)將微孔板倒扣于紙巾上并輕輕敲打，以確保所有孔內(nèi)均無(wú)洗滌緩沖液。避免產(chǎn)生泡沫！如果使用自動(dòng)洗板機(jī)，注意正確操作。 
 
9.2 檢驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作和儲(chǔ)存 
避免使用高血脂、溶血或黃疸的標(biāo)本，盡管在我們的檢測(cè)中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有副影響。明顯被污染的標(biāo)本（血清或血漿）不能用于檢測(cè)。 
樣品不應(yīng)加熱滅活。 
 
9.2.1 樣品準(zhǔn)備 
開(kāi)始試驗(yàn)前，患者的待測(cè)樣品必須以稀釋緩沖液稀釋如下（V1+V2）： 
 
V1+V2=1+100       加    10微升   患者待測(cè)樣品 
                   于   1000微升   稀釋緩沖液 
稀釋后及加入微孔板前，樣品必須充分混勻。