TALEN是一個(gè)被人們廣為接受的基因組編輯技術(shù)?，F(xiàn)在，研究人員們在TALEN的基礎(chǔ)上開發(fā)了一個(gè)新技術(shù)，該技術(shù)也可以在活細(xì)胞中監(jiān)控染色體的動態(tài)。
當(dāng)研究者們想知道特定核酸序列在細(xì)胞中的位置時(shí)，他們一般會進(jìn)行熒光原位雜交FISH。該技術(shù)利用熒光標(biāo)記的互補(bǔ)探針與目的鏈雜交，在細(xì)胞內(nèi)黑暗的背景中生成一個(gè)亮點(diǎn)。不過FISH技術(shù)需要固定，不能在活細(xì)胞中研究染色體的動態(tài)。
TALE的DNA結(jié)合域由一些非常保守的重復(fù)氨基酸序列模塊組成，每個(gè)模塊負(fù)責(zé)靶向一個(gè)DNA堿基。在這些模體中，主要由兩個(gè)核心氨基酸決定TALE的特異性識別。研究者們可以根據(jù)目的DNA的序列，設(shè)計(jì)特定的模體組合，進(jìn)而構(gòu)建能夠與任何基因組區(qū)域結(jié)合的蛋白。
Leonhardt和Torres-Padilla將TALE與熒光蛋白偶聯(lián)起來，對近著絲粒區(qū)域的重復(fù)序列（主要衛(wèi)星重復(fù)序列）進(jìn)行靶標(biāo)。他們在小鼠的胚胎干細(xì)胞中表達(dá)這個(gè)蛋白，并通過熒光成像在整個(gè)細(xì)胞周期中跟蹤上述染色體區(qū)域。
Torres-Padilla將她的技術(shù)稱為TGV（TALE介導(dǎo)的基因組可視化技術(shù)），Leonhardt并沒有給自己的方案命名，只是說這一技術(shù)“類似于活細(xì)胞FISH。”
作為一種活細(xì)胞技術(shù)，這種新方案可以用于檢測細(xì)胞中的分子動態(tài)。Leonhardt通過光漂白-恢復(fù)實(shí)驗(yàn)向人們展示，他構(gòu)建的TALE片段可以的與目標(biāo)穩(wěn)定結(jié)合幾分鐘。
Torres-Padilla及其團(tuán)隊(duì)將自己構(gòu)建的TALE片段插入了小鼠的受精卵，并在早期胚胎發(fā)育的過程中跟蹤蛋白的表達(dá)情況。此外，她的團(tuán)隊(duì)還構(gòu)建了靶標(biāo)端粒和次要衛(wèi)星重復(fù)序列的TALE片段，并且通過雙色成像同時(shí)檢測了這兩種序列。
據(jù)Leonhardt介紹，新研究為人們提供了一個(gè)研究基因組結(jié)構(gòu)和組織形式的重要工具，可以幫助人們揭示此前難以監(jiān)控的表觀遺傳學(xué)控制。www.shjsbio.com