中文名稱:人原鈣黏素1（PCDH1）ELISA試劑盒
包裝規(guī)格:48T/96T
適應(yīng)范圍:僅適用于科研實(shí)驗(yàn)
科研范疇:elisa試劑盒系列
公司供應(yīng)的科研產(chǎn)品種類繁多,elisa試劑盒/標(biāo)準(zhǔn)品/研抗體/細(xì)胞/生物培養(yǎng)基/生化試劑等,產(chǎn)品品質(zhì)高,*.選擇本公司產(chǎn)品一定能夠助您實(shí)驗(yàn)成功!
人原鈣黏素1（PCDH1）ELISA試劑盒 在實(shí)驗(yàn)中的幾個(gè)重要的操作步驟:
一、加樣
1.1 樣品稀釋液少加，或血清多加，都會(huì)引起本底增高。對(duì)于間接法來說，受上述兩個(gè)因素影響更大。因?yàn)檠逯惺軝z的特異性IgG 只占總IgG 中的一小部分。IgG 的吸附性很強(qiáng)，非特異IgG 可直接吸附到固相載體上，有時(shí)也可吸附到包被抗原的表面。這些非特異的IgG均可以和酶標(biāo)二抗發(fā)生反應(yīng)而造成較高陰性本底或假陽(yáng)性。如果加入的血清過多，高于規(guī)定的稀釋倍數(shù)，必將帶來陰性高值。
1.2 酶結(jié)合物的不正確加入。一般來講，酶也有一定的非特異吸附，將包被好的酶聯(lián)板再封閉，一方面也可避免酶的非特異性吸附。通常每孔加入的封閉液為120μl。如果加入的酶多于120μl 或加在較高的孔壁上或孔口，也會(huì)引起本底升高或假陽(yáng)性。
二、溫育
2.1 由于試劑盒確定的一定溫度下的反應(yīng)時(shí)間并不是反應(yīng)的終點(diǎn)，升高反應(yīng)的溫度，會(huì)加快反應(yīng)，同樣增加時(shí)間會(huì)延長(zhǎng)反應(yīng)，這樣得到的反應(yīng)程度會(huì)比試劑盒確定的反應(yīng)程度多，也會(huì)引起陰性高值或假陽(yáng)性。
2.2 由于試劑盒通常設(shè)定的反應(yīng)溫度為37 度，在這個(gè)溫度下放置30 分鐘，蒸發(fā)的水分會(huì)很多，對(duì)于整個(gè)反應(yīng)體系來講，各種反應(yīng)物的濃度會(huì)不斷增加，這樣必會(huì)導(dǎo)致反應(yīng)zui后的值升高。因此溫育時(shí)應(yīng)蓋上膠貼。
2.3 試劑盒在設(shè)計(jì)時(shí)，反應(yīng)是在靜置條件下完成的，如果反應(yīng)改變?yōu)檎駝?dòng)條件，會(huì)加快分子的熱運(yùn)動(dòng)，增加反應(yīng)的機(jī)會(huì)。
2.4 試劑盒的溫育過程是在培養(yǎng)箱中進(jìn)行，這和水浴的條件不一樣。水浴可是酶聯(lián)板迅速升溫，但較難將溫度控制在較穩(wěn)定的溫度，往往高于37 度，同樣會(huì)引起高值陰性。
三、洗板
3.1 各個(gè)廠家使用的洗液配方是不同的，是根據(jù)各自試劑的條件配制的，采用不配套的洗液常會(huì)得到不正常的反應(yīng)結(jié)果，包括本底過高。本公司的洗液采用*的洗滌系統(tǒng)不能和其它公司的試劑盒混用。
3.2 試劑盒中提供的洗液是濃縮的，應(yīng)該稀釋到規(guī)定的倍數(shù)使用，過多稀釋洗液，會(huì)影響洗液的效果，而使反應(yīng)的本底過高。
3.3 稀釋洗液的水應(yīng)該是新鮮的蒸餾水，電導(dǎo)率小于1.2μs。如果水中含有過多的Ca2+、Mg2+，這些離子會(huì)占用表面活性劑，影響洗滌效果。
3.4 洗板時(shí)，應(yīng)每孔加滿洗液，如果加入的洗液液量不夠，對(duì)洗滌的效果影響也是很大的。本公司的酶聯(lián)板板孔為400μl，比別的廠家的板孔大，因此洗了別公司的板后要及時(shí)調(diào)整液量，以避免加液量不滿。
3.5 洗板的次數(shù)不夠孔內(nèi)多余的抗原（抗體）或酶結(jié)合物不能*去除，也會(huì)因此本底升高。
3.6 洗板的強(qiáng)度和洗板的浸泡時(shí)間是密切相關(guān)的。洗板機(jī)不同，使用的泵不同，液體加入時(shí)的沖力不同。如果加入洗液的沖力不大，也沒有設(shè)定浸泡時(shí)間，同樣會(huì)使結(jié)果的A 值偏高。
3.7 洗板完畢后，要進(jìn)行拍板，盡量采用質(zhì)量好的毛巾和吸水紙，使用易掉渣的紙，紙屑會(huì)留在板孔中，由于紙屑中含有氧化劑而造成高值陰性。
四、顯色
4.1加A、B 液準(zhǔn)確，順序不能顛倒，要及時(shí)終止顯色。終止后要在3 分鐘內(nèi)讀數(shù)，否則強(qiáng)陽(yáng)性會(huì)變低。
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