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聯(lián)人:
蔡經(jīng)理
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上海市閔行區(qū)閔北路88弄1-17號、18-30號第13幢038室
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201107
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核酸純度、濃度與分子量測定實(shí)驗(yàn)

2013-8-5  閱讀(1914)

 小鼠ELISA試劑盒溴化乙錠是一種熒光染料,在凝膠電泳中,EB分子可嵌入核酸雙鏈的堿基對之間,在紫外線激發(fā)下發(fā)出熒光,其強(qiáng)度與DNA量成正比。同時(shí)核酸zui大吸收波長在260nm,在此波長下,吸光度1 A相當(dāng)于一定濃度的核酸,可以通過A260/A280 的比值,來測定所得核酸的純度。
實(shí)驗(yàn)材料DNA
試劑、試劑盒瓊脂糖TBE電泳緩沖液TE buffer溴化乙錠(EB)載樣緩沖液
儀器、耗材電泳儀電泳槽電子天平移液器槍頭點(diǎn)樣板微波爐紫外分光光度儀凝膠圖象分析儀
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 將分光光度計(jì)打開,預(yù)熱10分鐘。

2. 將核酸溶液中取2 µl,加(或純水)使體積成為100 µl。

3. 將稀釋溶液加入石英管,以TE buffer(或純水)為標(biāo)準(zhǔn)倒入另一管。

4. 在波長260、280 nm 處測定吸光值。

5. 比較在260 nm 及280 nm 之讀值。
小鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. A260/A280>1.8表示DNA/RNA的純度高。若數(shù)值<<1.8,表示純度低,這時(shí)由OD260測得的DNA含量較不可信,核酸溶液中含有較多蛋白質(zhì),因此將前述所得核酸再重新抽取。

2. 測定260 nm吸光值,OD=1.0代表值如下:

(1)ds DNA (double stranded DNA) = 50 mg/ml

(2)ss DNA (single stranded DNA or simgle-stranded RNA) = 40 mg/ml

(3)oligonucleotide = 33 mg/ml

3. 小鼠ELISA試劑盒 EB是致癌物質(zhì),切勿用手接觸,更不要污染環(huán)境。



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