上海研域生物科技有限公司
主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒,植物ELISA試劑盒,昆蟲ELISA試劑 ... |
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2013-10-25 閱讀(359)
抗原在ELISA試劑盒中的應(yīng)用:
抗原,是指能在體內(nèi)引起免疫反應(yīng)的物質(zhì);某一物質(zhì)能否成為抗原,首先是由它本身的某些性質(zhì)決定的。抗原的純度不高,特異性不強(qiáng);合成抗原一般為多肽片段,缺乏天然抗原所具有的立體結(jié)構(gòu)表位,親和力不高,可能導(dǎo)致相應(yīng)表位的抗體漏檢:基因重組抗原具有安全、特異性強(qiáng)、親和力高、產(chǎn)量大等特點(diǎn),是一種比較理想的抗原,但其純化比較挫折。熒光和化學(xué)發(fā)光測定的敏感度均高于比色測定,標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍亦較比色反應(yīng)寬,測定效果優(yōu)于常用的比色ELISA試劑盒,抗體在ELISA試劑盒中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。在使用雙單抗一步法時(shí),應(yīng)注意抗原過剩時(shí)的“鉤狀效應(yīng)”。而單抗僅針對抗體的單一表位,親和力和特異性均較多抗高,且制備技術(shù)成熟,產(chǎn)量大,批間差異小,但結(jié)合位點(diǎn)的單一也正是其弱點(diǎn)之所在,在雙抗體夾心法中,如包被和指示抗體使用同一單抗,則由于結(jié)合位點(diǎn)的缺乏,等閑造成假陰性結(jié)果。多為體外的蛋白、病菌等各類物質(zhì),椰油機(jī)體本身的,如自身免疫缺陷病癥會(huì)對自身產(chǎn)生免疫。多抗取白免疫動(dòng)物的抗血清,制備較簡單,但抗血清成分復(fù)雜,除含針對抗原(多個(gè)表位)的抗體外,還含有多種其他抗體,親和力和特異性相對要低于單抗,且制備周期長,批間差異較大。主要有3類,即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原??乖贓LISA試劑盒中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。
所有ELISA試劑盒存儲(chǔ)規(guī)定制造商的說明有三個(gè)例外:
一:嚴(yán)格按照InBios的JE檢測套件規(guī)定的樣品格式進(jìn)行測試,應(yīng)為一式兩份,并且在本次評測的所有樣品中進(jìn)行了測試以及選拔后所進(jìn)行后續(xù)測試;
二:Jacobson的同事提出的類似的方式進(jìn)行了評估。為了進(jìn)行評估,黃病毒陽性標(biāo)本被定性為JE負(fù)。定性的參數(shù)也很考究的,如時(shí)間以及可以測試的樣品數(shù)、易用性。此外,該試劑盒協(xié)議建議樣品不宜熱滅活,但是,可以在CDC協(xié)議樣品中進(jìn)行加熱,在56℃下持續(xù)30分鐘為限,達(dá)到滅活不定病毒血清檢測之前的尺度。這樣ELISA試劑盒按照制造商的指示結(jié)果進(jìn)行計(jì)算和分類。 PANBIO建議在測試前對所有的樣品進(jìn)行熱滅活,因此,以確定是否會(huì)影響到熱滅活的PANBIO試劑盒,面板的樣品(32 JEV陽性血清和13 JEV陽性腦脊液標(biāo)本)的正常熱滅活結(jié)果與統(tǒng)一時(shí)段的套件進(jìn)行了匹配。就是將樣品稀釋,根據(jù)試劑盒中所提供的緩沖區(qū)中的指令:CSF和血清分別為1:10和1:100稀釋。
三:用于這樣的診斷試劑盒中的將測試條校準(zhǔn)碼與校準(zhǔn)參數(shù)*地關(guān)聯(lián)的方法包括,首先*地分布多個(gè)測試條校準(zhǔn)碼和其代表的幾何區(qū)在多維校準(zhǔn)參數(shù)空間。該分布的進(jìn)行使分配測試條校準(zhǔn)碼之一到診斷試劑盒的測試條的量化誤差*地降低。該方法還包括在診斷試劑盒的存儲(chǔ)器中存儲(chǔ)分布的測試條校準(zhǔn)碼。