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LIF human 白血病抑制因子(重組人)

2014-12-17  閱讀(2444)

產(chǎn)品名稱:LIF human 白血病抑制因子(人)Leukemia inhibitory factor,重組人白血病抑制因子

產(chǎn)品說明:白血病抑制因子是一種多效的淋巴因子,屬于細胞因子中白細胞介素6家族。它zui初被描述為髓系白血病細胞增殖的抑制因子和髓系白血病細胞分化為巨噬細胞的誘導因子。LIF的其他活性包括抑制脂肪形成和在膽堿能神經(jīng)元的分化、造血作用、炎癥反應、骨代謝有重要作用。LIF能抑制胚胎干細胞的分化,因此在ES細胞培養(yǎng)中有非常重要的作用。人和小鼠LIF在氨基酸水平上有78%同源性。人源的LIF對小鼠和人細胞具有相同的活性,但是鼠科動物的LIF對人細胞不具有活性。

貨號:01-A0880

批號:01-1-88-8127

產(chǎn)品規(guī)格:10µg, 100µg, 1000µg

來源:ISOkine™重組人白血病抑制因子是來源于大麥胚乳細胞(Hordeum vulgare)。

形式:經(jīng)過0.2µm濾膜濾滅,從PBS中凍干,pH 7.2。

純度:經(jīng)SDS-PAGE凝膠電泳分析,純度大于98%。

溶解:注意: 打開瓶蓋前先用離心機離心。建議在無菌水溶解凍干粉狀重組蛋白質(zhì),終濃度不小于100 µg/ml。長期存儲建議添加一個載體蛋白(0.1% HSA或BSA)。

穩(wěn)定性:凍干粉蛋白質(zhì),雖然在室溫下能穩(wěn)定保存幾周,但儲存在-20°C。分裝的量以一次實驗用完為好并立即放于-20°C,或立即將重組蛋白放于-20°C。避免反復凍融循環(huán)。

生物活性:每批ISOkine™生長因子都進行生物活性測試,并已證實與其他商業(yè)來源的生長因子有類似的生物活性,ISOkine™人LIF的生物活性是在一定劑量依賴下通過誘導TF-1細胞增殖的能力來決定的。對應于比活性> 2.5 x 10 e6 U / mg來說,這種效應的ED50值通常是低于0.4 ng / ml。對具體的應用和細胞系應確定*濃度。

內(nèi)毒素水平:ISOkine™系列產(chǎn)品內(nèi)毒素水平都低于0.005ng/µg  (< 0.05EU/µg).

MAT分析:純化的ISOkine™系列產(chǎn)品不攜帶有致熱的或促炎污染物,因為用人10-plex細胞因子結合單核細胞活化測試分析檢測IL-6, TNF-alpha 和IL-1beta的誘導. Ref. The Blood Bank, University Hospital of Iceland, Reykjavik, Iceland。

分子量: 重組人LIF包含180個氨基酸和一個長度為16個氨基酸的組氨酸標簽,總氨基酸數(shù)為196個。預計分子量為21.8KDa。由于糖基化,重組蛋白在SDS-PAGE電泳下遷移顯示分子量大小為25-30 kDa。

 

白血病抑制因子(人)簡介

1.LIF的產(chǎn)生

已在活化的T細胞、單核細胞、神經(jīng)膠質(zhì)細胞、肝成纖維細胞、骨髓基質(zhì)細胞、胚胎干細胞、胸腺上皮細胞等多種細胞中發(fā)現(xiàn)有LIF的表達。

2.LIF的分子結構和基因

人的LIF基因定位于第22號染色體,基因長度分別為6.0kb,含有3個外顯子和2個內(nèi)含子,基因編碼區(qū)域具有高度的保守序列。LIF為180個氨基酸,核心蛋白分子量為20kDa,有7個糖基化位點,6個Cys,分子內(nèi)部二硫鍵對于維持LIF分子的結構和生物學活性可能起重要作用。由于糖基化程度的不同,LIF分子量和電荷有所差別,分子量38~64kDa,IP8.6~9.2。LIF體外生物學功能似乎與糖基化程度無關,但糖基化是否影響LIF在體內(nèi)穩(wěn)定性和功能尚待確定。在氨基酸水平上,LIF與抑瘤素-M(oncostatin M,OSM)和睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)有一事實上的同源性,而且在蛋白質(zhì)分子二級結構上也有相似之處。

3.LIF的受體 

ILF受體α鏈為低親和力受體,其結構屬于紅細胞生成素受體家族成員,含有2個該家族特征性結構域。gp130是LIF受體的另一個亞單位,與LIF受體α鏈共同組成高親和力受體。LIF受體分布較廣泛,如脂肪細胞、成骨細胞、神經(jīng)細胞、胚胎癌細胞、胚胎干細胞、M1白血病細胞以及活化的巨噬細胞等。

4.LIF的生物學活性

(1)調(diào)節(jié)細胞的增殖、分化和表型:LIF抑制小鼠胚胎干細胞(embryonic stem cell,ES)的分化。對于造血系統(tǒng)中的腫瘤細胞,LIF常顯示出抑制效應,同時誘導這些腫瘤細胞的分化,例如LIF可抑制小鼠白血病M1細胞的增殖,誘導其轉變?yōu)榫奘杉毎硇停绫磉_Fc受體,并獲得吞噬能力等。對單核細胞的分化也超誘導作用。LIF與GM-CSF、G-CSF或IL-6協(xié)同抑制HL-60和U937細胞的生長,并誘導其分化。LIF增強IL-3對巨核細胞前體的造血干細胞的致有絲分裂作用,提高體內(nèi)巨核細胞和血小板的數(shù)量。LIF還可促進成肌細胞的增殖。在一定條件下,LIF可促進新生大鼠背根神經(jīng)節(jié)中的神經(jīng)元表型從腎上腺素能型轉變?yōu)槟憠A能型,因此LIF又稱為膽堿能神經(jīng)元分化因子(cholinergic neuronal differentia-tion factor,CNF)。此外,LIF還可促進移植神經(jīng)嵴分化的胚胎性神經(jīng)元的存活。

(2)抑制脂蛋白脂酶活性,降低3T3-L1脂肪細胞對游離脂肪酸的攝取。

(3)促進骨的重吸收,這種作用可能是通過LIF刺激成骨細胞合成前列腺素所介導的。

(4)誘導肝臟急性期蛋白的產(chǎn)生。

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