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植物氧化應(yīng)激活性氧單線態(tài)氧氣比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)二甲基-4-亞硝基苯胺,受到單線態(tài)氧氣-的作用,出現(xiàn)去色現(xiàn)象,由分光光度儀比色分析,定量檢測(cè)植物組織細(xì)胞內(nèi)單線態(tài)氧氣活性氧族的生成和增加的經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種新鮮的植物組織(葉片、谷粒、種子等),以及葉綠體等細(xì)胞器的單線態(tài)氧氣檢測(cè)??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。
技術(shù)背景
超氧自由基陰離子(superoxide radical;O2-)、過(guò)氧化氫(hydrogen peroxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxyl radical;OH-)、過(guò)氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氫過(guò)氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitrite anion;ONOO-)次氯酸(hypochlorous acid;HClO)、半醌自由基(semiquinone radical)、單線態(tài)氧氣(singlet oxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的產(chǎn)生和增多,將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。其中單線態(tài)氧氣(singlet oxygen;1 O2)是分子氧(O2)的抗磁形式或電激發(fā)形式。通過(guò)染料分子,例如孟加拉紅(Rose Bengal)、亞甲基蘭(Methylene Blue)、卟啉類化合物(Porphyrins)染料的光敏過(guò)程中能量轉(zhuǎn)移產(chǎn)生,或過(guò)氧化氫和次氯酸的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生。單線態(tài)氧氣可以調(diào)節(jié)紫外線A輻射的生物學(xué)作用、激活各種細(xì)胞信號(hào)通路等。單線態(tài)氧氣會(huì)導(dǎo)致植物的光動(dòng)力損傷(photodynamic damage)和動(dòng)物心血管問(wèn)題?;诙谆?4-亞硝基苯胺(N,N-Dimethyl-p-nitrosoaniline;PNDA或RNO)作為單線態(tài)氧氣的選擇性受體,在單線態(tài)氧氣的存在下,產(chǎn)生去色作用,在分光光度儀下(440nm波長(zhǎng)),呈現(xiàn)吸光峰值的降低。據(jù)此定量檢測(cè)植物組織細(xì)胞內(nèi)單線態(tài)氧氣活性氧族的濃度。
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