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訪問次數(shù):8217更新時(shí)間:2015-06-10 16:13:00
程成
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現(xiàn)貨供應(yīng)雞細(xì)胞凋亡抑制因子ELISA試劑盒齊一生物科技有限公司主要經(jīng)營(yíng)進(jìn)口原裝Elisa試劑盒,種類齊全,價(jià)格實(shí)惠,購(gòu)買我公司產(chǎn)品的新老客戶,可享免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù),可檢測(cè)Human,Rat、Mouse、Porcine、Sheep、Monkey、Goat、Bovine、Canine、Rabbit、Chicken、Duck、Fish、Plant 等各種樣本。全程提供。如有什么問題請(qǐng)給我們
現(xiàn)貨供應(yīng)雞細(xì)胞凋亡抑制因子ELISA試劑盒規(guī) 格:96T/48T
檢測(cè)標(biāo)本:血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清,組織勻漿等
檢測(cè)方法:ELISA
檢測(cè)類型:酶聯(lián)免疫夾心法
產(chǎn)品的用途:僅供科研究課題使用
價(jià)格及詳細(xì)資料:電議,,到我司qysw@qiyibio. .齊一生物科技(上海)有限公司提供的ELISA試劑盒受到了廣大科研單位的*肯定和認(rèn)同.*保證,價(jià)格公道,傾力為國(guó)內(nèi)外科研院校實(shí)驗(yàn)室提供的產(chǎn)品.若有需要,我司將竭誠(chéng)為您服務(wù)!本試劑盒用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中含量.
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中該產(chǎn)品水平.用純化的本產(chǎn)品抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入本產(chǎn)品抗原,再與HRP標(biāo)記的本產(chǎn)品抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色.TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色.顏操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
色的深淺和樣品中的本產(chǎn)品呈正相關(guān).用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中該產(chǎn)品濃度.