上海篤瑪生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,標準品,生化試劑,抗體,染液,血清 |
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參考價 | 面議 |
犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒
試劑盒性能
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。
4. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個月
犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒
ELISA 實驗步驟:
1.包被抗原:稀釋液pH 9.6 碳酸鹽緩沖液,多肽濃度2ug/ml,0.1ml/孔,4oC過夜,洗凈。
2.1%BSA (pH 9.6 碳酸鹽緩沖液) 封閉,0.1ml/孔,37oC1h,洗凈。
3.稀釋抗血清(可稀釋不同濃度) 0.1ml/孔,37oC 30分鐘,洗凈。
4.稀釋辣根過氧化物每標記的二抗0.1ml/孔,37oC 40分鐘,洗凈。
5.顯色:TMB顯色
A液:四甲基聯(lián)苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍.
B液:5ul雙氧水加蒸餾水12.5ml 。
終止液:2N硫酸
A液、B液各一滴,比光顯色10分鐘,終止液一滴。
6.450nm 波長測OD值
犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒
酶聯(lián)免疫試驗步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
編 號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
加樣反應:加標準品或樣本50μl/孔到各自的微孔中,然后加酶標記物50μl/孔,再加入50μl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應30分鐘。
洗 滌:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250μl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
顯 色:每孔加入底物液A 50μl,再加底物液B 50μl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘(若藍色過淺,可適當延長反應時間)。
終 止:每孔加入終止液50μl,輕輕振蕩混勻,終止反應。