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一、pH值對(duì)發(fā)酵的影響
1、影響酶的活性,當(dāng)pH值抑制菌體中某些酶的活性時(shí),會(huì)阻礙菌體的新陳代謝;
2、影響微生物細(xì)胞膜所帶電荷的狀態(tài),改變細(xì)胞膜的通透性,影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄;
3、影響培養(yǎng)基中某些組分的解離,進(jìn)而微生物對(duì)這些成分的吸收;
4、pH值不同,往往引起菌體代謝過(guò)程的不同,使代謝產(chǎn)物的質(zhì)量和比例發(fā)生改變。
二、發(fā)酵過(guò)程pH值的變化
在發(fā)酵過(guò)程中,隨著菌種對(duì)培養(yǎng)基種碳、氮源的利用,隨著有機(jī)酸和氨基酸的積累,會(huì)使pH值產(chǎn)生一定的變化。
1、生長(zhǎng)階段:菌體產(chǎn)生蛋白酶水解培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì),生成銨離子,使pH上升至堿;隨著菌體量增多,銨離子的消耗也增多,另外糖利用過(guò)程中有機(jī)酸的積累使pH值下降。
2、生產(chǎn)階段:這個(gè)階段pH值趨于穩(wěn)定。
3、自溶階段:隨著養(yǎng)分的耗盡,菌體蛋白酶的活躍,培養(yǎng)液中氨基氮增加,致使pH又上升,此時(shí)菌體趨于自溶而代謝活動(dòng)終止。
由此可見,在適合于菌生長(zhǎng)及合成產(chǎn)物的環(huán)境條件下,菌體本身具有一定的調(diào)節(jié)pH的能力,但是當(dāng)外界條件變化過(guò)于劇烈,菌體就失去了調(diào)節(jié)能力,培養(yǎng)液的pH就會(huì)波動(dòng)。
三、引起發(fā)酵液pH值異常波動(dòng)的因素
pH值的變化決定于所用的菌種、培養(yǎng)基的成分和培養(yǎng)條件。
1、pH下降:
(1)培養(yǎng)基中碳、氮比例不當(dāng)。碳源過(guò)多,特別是葡萄糖過(guò)量,或者中間補(bǔ)糖過(guò)多加上溶氧不足,致使有機(jī)酸大量積累而pH下降;
(2)消泡劑加得過(guò)多;
(3)酸性物質(zhì)的存在,銨被利用,pH下降。
2、pH上升:
(1)發(fā)酵罐培養(yǎng)基中碳、氮比例不當(dāng)。氮源過(guò)多,氨基氮釋放,使pH上升;
(2)堿性物質(zhì)存在;
(3)中間補(bǔ)料氨水活尿素等堿性物質(zhì)加入過(guò)多。
四、發(fā)酵pH值的確定和控制
1、發(fā)酵pH值的確定
微生物發(fā)酵的zui適pH值范圍一般是在5~8之間。
zui適pH值是根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)確定的。
不發(fā)酵罐將發(fā)酵培養(yǎng)基調(diào)節(jié)成不同的出發(fā)pH值,進(jìn)行發(fā)酵,在發(fā)酵過(guò)程中,定時(shí)測(cè)定和調(diào)節(jié)pH值,以分別維持出發(fā)pH值,或者利用緩沖液來(lái)配制培養(yǎng)基來(lái)維持。
到時(shí)觀察菌體的生長(zhǎng)情況,以菌體生長(zhǎng)達(dá)到zui高值的pH值為菌體生長(zhǎng)的合適pH值。
用同樣的方法,可測(cè)得產(chǎn)物合成的合適pH值。
同一產(chǎn)品的合適pH值,與所用的菌種、培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件有關(guān)。
在確定合適發(fā)酵pH值時(shí),不定期要考慮培養(yǎng)溫度的影響,若溫度提供或降低,合適pH值也可能發(fā)生變動(dòng)。
2、pH值的控制
(1)首先考慮和試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方,使它們有個(gè)適當(dāng)?shù)呐浔?,使發(fā)酵過(guò)程中的pH值變化在合適的范圍內(nèi)。
(2)發(fā)酵罐在發(fā)酵過(guò)程中直接補(bǔ)加酸或堿和補(bǔ)料的方式來(lái)控制;補(bǔ)充酸(如(NH4)2SO4)和堿(如NaNO3)來(lái)控制。
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