5'-RACE 3'-RACE

服務(wù)要求 
1. 請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料（各種材料的 RNA 提取量請(qǐng)參照“總 RNA 的提取” ) ，或直接提供純化好的 總 RNA 。每次實(shí)驗(yàn)操作所需的 RNA 量為 1 ~ 5 m g ，如果您的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行多次 RACE 操作，則應(yīng)視具體情況相應(yīng)增加樣品量。
2. 請(qǐng)通過(guò) 提供已知部分的 cDNA 序列及方向。
3. 請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料： RNA 來(lái)源、純度、豐度、所擴(kuò)增基因的估計(jì)長(zhǎng)度、是否具有同源序

操作程序

2. 設(shè)計(jì)引物通過(guò) RT-PCR 對(duì)已知 cDNA 序列進(jìn)行驗(yàn)證。
3. 驗(yàn)證成功后，根據(jù) cDNA 序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行 RACE 操作。
4. 擴(kuò)增出來(lái)的片段克隆到普通載體中測(cè)序（或 PCR 產(chǎn)物直接測(cè)序 ) 。
5. 分析結(jié)果，根據(jù)您的要求決定是否繼續(xù)設(shè)計(jì)引物進(jìn)行下一次 RACE 操作。
6. 實(shí)驗(yàn)完成后，將為您提供完整的實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程、實(shí)驗(yàn)報(bào)告、測(cè)序結(jié)果以及測(cè)序彩色峰圖、引物、質(zhì)粒以及含有該質(zhì)粒的 菌種（穿刺菌）等。