人糖類抗原199（CA199）ELISA試劑盒使用說明書

人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒使用說明書，用途,價格，品牌，注意事項等資訊，本司*供應進口/國產(chǎn)ELISA檢測試劑盒,產(chǎn)品種類繁多,現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保障,ELISA種屬涵蓋了科研實驗所需的所有動物，為客戶提供了免費代測服務，咨詢！

中文名：人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒
別名：人糖類抗原199(CA199)ELISA Kit
貨號：fk-m0038
供應商：上海樊克
規(guī)格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個月
樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
檢測方法：酶聯(lián)免疫吸附法
檢測波長：450nm
研究領(lǐng)域：炎癥研究、神經(jīng)生物學、新陳代謝、信號通路、免疫學、其他研究。
供應貨期：現(xiàn)貨供應
友情提示：僅供科研實驗，不得用于其他用途；使用前仔細閱讀ELISA試劑盒說明書。

人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒組成及試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒使用說明書說明：
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。
2．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。 
3．中、英文說明書可能會有不*之處，請以英文說明書為準。
4．剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響。

人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒使用說明書實驗原理：
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗CA199抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗CA199抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CA199呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。 

人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒使用說明書標本的采集及保存：
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會影響zui后檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

人糖類抗原199(CA199)ELISA檢測試劑盒標本的稀釋原則：
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標準曲線的范圍內(nèi)，檢測的結(jié)果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。zui后計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。
標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為100 ng/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）100 ng/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

人糖類抗原199(CA199)ELISA Kit生物素標記抗體的稀釋原則：
臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：
臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。

 

人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒操作步驟：

1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10 孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉，再各取50μl 分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為120 U/L ，80 U/L，40 U/L，20 U/L，10 U/L）。

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液：將30（48T 的20 倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T 的20 倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止

液后15 分鐘以內(nèi)進行。

人糖類抗原199(CA199)ELISA檢測試劑盒注意事項：

1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未

用完，板條應裝入密封袋中保存。

2． 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3． 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，*使排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值于標準品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計3算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6． 底物請避光保存。

7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9． 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R 值為0.990 以上。

2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%

檢測范圍：

8 UL– 150 U/L

人糖類抗原199(CA199)ELISA Kit相關(guān)產(chǎn)品如下：
豬S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)ELISA試劑盒
魚防御素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒
大鼠溶質(zhì)載體家族2(促進葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白)成員3(SLC2A3)ELISA試劑盒
猴肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒
大鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒
雞核糖核酸酶L(RNASEL)ELISA試劑盒
雞谷胱甘肽還原酶(GSR)ELISA試劑盒
兔腺苷酸環(huán)化酶3(ADCY3)ELISA試劑盒
牛腸堿性磷酸酶(IAP)ELISA試劑盒
犬硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA試劑盒
人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒
大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒
兔基質(zhì)Gla蛋白(MGP)ELISA試劑盒
牛細胞表面粘蛋白1(MUC1)ELISA試劑盒
雞磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C(PIPLC)ELISA試劑盒
大鼠凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA試劑盒
豬抗瓜氨酸纖維蛋白原抗體(CFAb)ELISA試劑盒
小鼠核糖核酸酶A3(RNASEA3)ELISA試劑盒
牛半乳凝素8(GAL8)ELISA試劑盒
人清道夫受體B(SRB)ELISA試劑盒
綿羊基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)ELISA試劑盒
豬谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒
兔IgEFc片段,低親和力II,受體(CD23)(FCER2)ELISA試劑盒
犬巨噬細胞炎性蛋白相關(guān)蛋白1(MRP1)ELISA試劑盒
小鼠β微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒
馬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)ELISA試劑盒
人PDZ和LIM結(jié)構(gòu)域7(Enigma)(PDLIM7)ELISA試劑盒